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公开(公告)号:CN107084957B
公开(公告)日:2020-09-08
申请号:CN201710319298.6
申请日:2017-05-03
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种对细胞内活性氧含量进行检测的方法,该方法能够得到不同浓度下暴露污染物对应的单个活细胞的DCF荧光信号值。本发明对细胞内活性氧含量的检测方法检测结果精确,克服了由于污染物暴露导致细胞数量变化从而使最终荧光强度测量不准确的问题,本发明检测方法能够真实反映在某个浓度下对应的单个细胞荧光信号值,从而能够真实准确反映污染物暴露对细胞的损伤,为体外细胞模型在污染物毒性评价中的应用打下了更为扎实的基础。
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公开(公告)号:CN107189986B
公开(公告)日:2020-08-11
申请号:CN201710616052.5
申请日:2017-07-25
Applicant: 南京大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12Q1/42
Abstract: 本发明公开了一种基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法,该方法选用与内质网应激相关的CHOP基因作为特异性诱导基因构建CHOP启动子,再将CHOP启动子与便于检测的SEAP基因连接,构建慢病毒CHOP‑SEAP质粒载体;最后将CHOP‑SEAP质粒转染至Hela细胞中。本发明还公开了上述基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法构建的报告基因细胞株的应用。本发明方法构建的报告基因细胞株能够指示早期细胞毒性损伤,大大提高细胞株的检测敏感性和降低检测限值,从而表征毒害污染物的早期毒性,且适用于大多数毒害污染物;同时还可表征实际水体的综合毒性。细胞株选用的报告基因SEAP基因具有便于检测、可动态监测的优点。
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公开(公告)号:CN107084957A
公开(公告)日:2017-08-22
申请号:CN201710319298.6
申请日:2017-05-03
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/6402 , G01N21/6428 , G01N21/6452 , G01N2021/6439
Abstract: 本发明公开了一种对细胞内活性氧含量进行检测的方法,该方法能够得到不同浓度下暴露污染物对应的单个活细胞的DCF荧光信号值。本发明对细胞内活性氧含量的检测方法检测结果精确,克服了由于污染物暴露导致细胞数量变化从而使最终荧光强度测量不准确的问题,本发明检测方法能够真实反映在某个浓度下对应的单个细胞荧光信号值,从而能够真实准确反映污染物暴露对细胞的损伤,为体外细胞模型在污染物毒性评价中的应用打下了更为扎实的基础。
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公开(公告)号:CN106191194A
公开(公告)日:2016-12-07
申请号:CN201610499457.0
申请日:2016-06-29
Applicant: 南京大学
CPC classification number: G01N33/5014 , G01N21/6486 , G01N33/5067
Abstract: 本发明公开了一种对细胞内活性氧含量的检测方法,该方法能够得到不同浓度下暴露污染物对应的单个活细胞的DCF荧光信号值。本发明对细胞内活性氧含量的检测方法检测结果精确,克服了由于污染物暴露导致细胞数量变化从而使最终荧光强度测量不准确的问题,本发明检测方法能够真实反映在某个浓度下对应的单个细胞荧光信号值,从而能够真实准确反映污染物暴露对细胞的损伤,为体外细胞模型在污染物毒性评价中的应用打下了更为扎实的基础。
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公开(公告)号:CN106148180A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201610529834.0
申请日:2016-07-06
Applicant: 南京大学
CPC classification number: C12M23/58 , C12M25/02 , C12M27/02 , C12M29/04 , C12N5/0693
Abstract: 本发明公开了一种将体外胃肠模拟装置与Transwell模拟吸收装置结合起来研究环境污染物进入人体胃肠道后被肠道消化吸收的装置和方法,本发明的装置及方法完整地模拟了环境污染物进入人体胃肠道后被肠道消化吸收的过程,更加接近真实的消化吸收过程,对后续环境污染物被人体吸收后的毒性情况研究以及环境污染物对人体健康风险评估具有重要意义。
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公开(公告)号:CN106092991A
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201610503947.3
申请日:2016-06-29
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/543 , G01N1/28
CPC classification number: G01N21/6486 , G01N1/28 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种利用DAPI荧光染料对活细胞内活性氧含量的检测方法,该方法能够得到不同浓度下暴露污染物对应的单个活细胞的DCF荧光信号值。本发明对细胞内活性氧含量的检测方法检测结果精确,克服了由于污染物暴露导致细胞数量变化从而使最终荧光强度测量不准确的问题,本发明检测方法能够真实反映在某个浓度下对应的单个细胞荧光信号值,从而能够真实准确反映污染物暴露对细胞的损伤,为体外细胞模型在污染物毒性评价中的应用打下了更为扎实的基础。
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公开(公告)号:CN105695451B
公开(公告)日:2019-02-15
申请号:CN201610243307.3
申请日:2016-04-19
Applicant: 南京大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种人体胃中微生物总DNA的提取方法,本发明提取方法是在现有提取方法的基础上加入了对胃提取液的前处理步骤,从而有效解决了由于样品低pH因素和人体基因组DNA干扰导致的提取效率低和效果差的问题,本发明的提取方法相较于现有方法其提取效率提高了一倍以上,所提取的微生物DNA浓度高,微生物总DNA占有比例高,16S rRNA v1‑v2区PCR产物条带明亮清晰,进而能够更加准确全面反应胃中的微生物状况,为后续微生物群落结构与功能的研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN105695451A
公开(公告)日:2016-06-22
申请号:CN201610243307.3
申请日:2016-04-19
Applicant: 南京大学
IPC: C12N15/10
CPC classification number: C12N15/1003
Abstract: 本发明公开了一种人体胃中微生物总DNA的提取方法,本发明提取方法是在现有提取方法的基础上加入了对胃提取液的前处理步骤,从而有效解决了由于样品低pH因素和人体基因组DNA干扰导致的提取效率低和效果差的问题,本发明的提取方法相较于现有方法其提取效率提高了一倍以上,所提取的微生物DNA浓度高,微生物总DNA占有比例高,16S rRNA v1-v2区PCR产物条带明亮清晰,进而能够更加准确全面反应胃中的微生物状况,为后续微生物群落结构与功能的研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN107189986A
公开(公告)日:2017-09-22
申请号:CN201710616052.5
申请日:2017-07-25
Applicant: 南京大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12Q1/42
Abstract: 本发明公开了一种基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法,该方法选用与内质网应激相关的CHOP基因作为特异性诱导基因构建CHOP启动子,再将CHOP启动子与便于检测的SEAP基因连接,构建慢病毒CHOP‑SEAP质粒载体;最后将CHOP‑SEAP质粒转染至Hela细胞中。本发明还公开了上述基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法构建的报告基因细胞株的应用。本发明方法构建的报告基因细胞株能够指示早期细胞毒性损伤,大大提高细胞株的检测敏感性和降低检测限值,从而表征毒害污染物的早期毒性,且适用于大多数毒害污染物;同时还可表征实际水体的综合毒性。细胞株选用的报告基因SEAP基因具有便于检测、可动态监测的优点。
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公开(公告)号:CN106198469A
公开(公告)日:2016-12-07
申请号:CN201610499423.1
申请日:2016-06-29
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/6486
Abstract: 本发明公开了一种利用Hoechst 33258荧光染料对活细胞内活性氧含量的检测方法,该方法能够得到不同浓度下暴露污染物对应的单个活细胞的DCF荧光信号值。本发明对细胞内活性氧含量的检测方法检测结果精确,克服了由于污染物暴露导致细胞数量变化从而使最终荧光强度测量不准确的问题,本发明检测方法能够真实反映在某个浓度下对应的单个细胞荧光信号值,从而能够真实准确反映污染物暴露对细胞的损伤,为体外细胞模型在污染物毒性评价中的应用打下了更为扎实的基础。
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