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公开(公告)号：CN118620850B
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202411117038.7
申请日：2024-08-15
申请人： 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
摘要： 本发明涉及冠状病毒弱毒疫苗开发技术领域，具体涉及一种禽传染性支气管炎病毒弱毒株的制备及其应用。本发明首先采用TAR克隆技术建立了QX‑IBV反向遗传操作系统，随后通过密码子对去优化重新编码了病毒的部分基因组，得到了禽传染性支气管炎病毒弱毒株rQX‑CPDF7。本发明经过对1日龄SPF雏鸡的致病性分析发现，经过密码子对去优化的毒株极大降低了病毒的致病性，并且能够为强毒株的攻击提供有效的免疫保护。为禽传染性支气管炎病毒弱毒疫苗的开发提供了一种切实可行的方案，同时为禽传染性支气管炎病毒的致病机理的研究提供了参考。
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公开(公告)号：CN118652858B
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202411103971.9
申请日：2024-08-13
申请人： 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
摘要： 本发明涉及一种快速制备传染性支气管炎病毒弱毒株的方法及应用。本发明以疫苗毒株H120为骨架，首先将QX型毒株的S基因替换到H120毒株的对应区域，再通过密码子对去优化将H120非结构蛋白中的NSP14、NSP15和NSP16编码基因进行重新编码，得到rH‑CPDF7‑QX(S)重组弱毒株。rH‑CPDF7‑QX(S)重组弱毒株感染1日龄SPF雏鸡后未发现雏鸡死亡；并且能够为强毒株的攻击提供有效的免疫保护。通过使用rH‑CPDF7骨架，除了能够嵌合QX型S基因外，还能够通过TAR克隆分别嵌合不同基因型的S基因，能够为不同基因型弱毒株的快速开发提供参考。
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公开(公告)号：CN118652858A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202411103971.9
申请日：2024-08-13
申请人： 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
摘要： 本发明涉及一种快速制备传染性支气管炎病毒弱毒株的方法及应用。本发明以疫苗毒株H120为骨架，首先将QX型毒株的S基因替换到H120毒株的对应区域，再通过密码子对去优化将H120非结构蛋白中的NSP14、NSP15和NSP16编码基因进行重新编码，得到rH‑CPDF7‑QX(S)重组弱毒株。rH‑CPDF7‑QX(S)重组弱毒株感染1日龄SPF雏鸡后未发现雏鸡死亡；并且能够为强毒株的攻击提供有效的免疫保护。通过使用rH‑CPDF7骨架，除了能够嵌合QX型S基因外，还能够通过TAR克隆分别嵌合不同基因型的S基因，能够为不同基因型弱毒株的快速开发提供参考。
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公开(公告)号：CN118620850A
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202411117038.7
申请日：2024-08-15
申请人： 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
摘要： 本发明涉及冠状病毒弱毒疫苗开发技术领域，具体涉及一种禽传染性支气管炎病毒弱毒株的制备及其应用。本发明首先采用TAR克隆技术建立了QX‑IBV反向遗传操作系统，随后通过密码子对去优化重新编码了病毒的部分基因组，得到了禽传染性支气管炎病毒弱毒株rQX‑CPDF7。本发明经过对1日龄SPF雏鸡的致病性分析发现，经过密码子对去优化的毒株极大降低了病毒的致病性，并且能够为强毒株的攻击提供有效的免疫保护。为禽传染性支气管炎病毒弱毒疫苗的开发提供了一种切实可行的方案，同时为禽传染性支气管炎病毒的致病机理的研究提供了参考。
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公开(公告)号：CN115896173A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211370352.7
申请日：2022-11-03
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/50 , C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12Q1/70 , C12Q1/02 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种快速构建禽传染性支气管炎病毒感染性克隆的方法，构建方法包括以YAC‑BAC穿梭质粒为骨架，采用TAR技术，运用酿酒酵母高效同源重组机制，快速完成包含禽传染性支气管炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建。本发明克服了冠状病毒IBV基因组较大难以操作；病毒基因组部分序列在细菌宿主中繁殖时的不稳定性；酶切位点不容易寻找，酶切连接效率低下等问题。同时构建以IBV病毒为载体嵌合外源报告基因的cDNA克隆，能够在以IBV为骨架的病毒载体中稳定表达外源基因，为以IBV病毒为载体嵌合外源基因的疫苗开发和表达外源报告基因的报告病毒的抗病毒药物筛选提供依据。
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