一种以葡萄种子为受体材料的农杆菌介导遗传转化方法

    公开(公告)号:CN115807033B

    公开(公告)日:2024-11-22

    申请号:CN202310013916.X

    申请日:2023-01-05

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明公开了一种以葡萄种子为受体材料的农杆菌介导遗传转化方法,属于植物基因工程技术领域。该方法包括以下步骤:S1、葡萄种子经预处理后,培养至种皮开裂;S2、采用农杆菌侵染法将种皮开裂的葡萄种子侵染,得到侵染后的葡萄种子;S3、侵染后的葡萄种子培养后,筛选得到农杆菌转化植株。本发明方法中再生植株的发生途径绕开了由外植体脱分化形成、愈伤组织再分化形成体胚的漫长步骤,且受体统一、充足,只需4个月就可生长为完整葡萄小苗,相较于胚性愈伤受体材料的转化周期缩短了2个月,为建立高效葡萄遗传转化体系奠定了强有力的技术支撑。

    中国野生种山葡萄E3泛素连接酶HOS1基因特异启动子及其应用

    公开(公告)号:CN116004669A

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202211225517.1

    申请日:2022-10-09

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明涉及基因工程领域,中国葡萄属野生种山葡萄E3泛素连接酶HOS1基因低温诱导型启动子序列及其应用,本发明采用巢式PCR法克隆了中国葡萄属野生种山葡萄株系‘双峰’低温胁迫应答相关的E3泛素连接酶HOS1基因上游调控序列,其大小为1764bp。所克隆的中国葡萄属野生种山葡萄E3泛素连接酶HOS1基因启动子调控的基因表达模式与欧洲冷敏感性葡萄E3泛素连接酶HOS1基因启动子的调控模式不同,为一新型的冷诱导低丰度表达的启动子。并通过山葡萄与欧洲葡萄启动子序列的缺失片段,进而可对山葡萄的种质资源进行鉴定。应用该启动子与GUS报告基因融合在拟南芥中表达,在常温下有基本的表达,经低温诱导GUS活性减弱。

    自噬相关基因VaATG6在葡萄耐寒性调控中的应用

    公开(公告)号:CN119410651A

    公开(公告)日:2025-02-11

    申请号:CN202411470392.8

    申请日:2024-10-21

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域,尤其涉及自噬相关基因VaATG6在葡萄耐寒性调控中的应用。本发明揭示了VaATG6基因在调控葡萄低温抗逆性方面具有显著作用。本发明通过在葡萄中过表达VaATG6基因提升自噬活性,显著增强葡萄的抗冻能力;而敲除该基因则降低自噬活性,使葡萄对低温胁迫更为敏感。本发明确认了VaATG6基因是葡萄耐寒性的正向调控因子,并为培育耐寒性葡萄新品种提供了重要的分子工具,具有广阔的农业应用前景。

    山葡萄钙结合蛋白基因VamCP1、其编码蛋白、表达载体及应用

    公开(公告)号:CN119193608A

    公开(公告)日:2024-12-27

    申请号:CN202411431113.7

    申请日:2024-10-14

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明申请公开了一种山葡萄钙结合蛋白基因VamCP1、其编码蛋白、表达载体及应用。本申请构建了pCAMBIA2300‑VamCP1‑GFP过表达载体,通过农杆菌介导的花序侵染法和瞬时转化法分别将其转化至拟南芥与“霞多丽”葡萄中,研究钙结合蛋白VamCP1的转基因植株在低温胁迫下的抗性。结果表明VamCP1基因能够提高抗氧化酶活性及渗透调节物质的含量,减轻植物细胞膜的损坏并减少电解质的渗透。该基因通过诱导相关耐寒基因的表达和清除过量的ROS来增强植物的抗低温胁迫性能。

    一种利用葡萄愈伤组织瞬时转化外源基因的方法

    公开(公告)号:CN115786393A

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN202211357579.8

    申请日:2022-11-01

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用葡萄愈伤组织瞬时转化外源基因的方法,属于生物技术领域。本发明首先将葡萄叶片脱分化,诱导其形成愈伤组织,然后以携带GUS基因的农杆菌,利用农杆菌侵染法,在超声处理和真空处理相结合的方式下实现外源DNA片段在葡萄愈伤组织中的瞬时表达。本发明方法可以将任何基因瞬时转化至葡萄愈伤组织中,时间短,效率高,能在3‑4周时间内诱导出愈伤组织,诱导率可以达到100%,并且在有足够愈伤组织的情况下,在2天的时间就能获得瞬时转化的愈伤组织。

    一种提高赤霞珠葡萄幼苗抗倒春寒冻害能力的方法

    公开(公告)号:CN114938755A

    公开(公告)日:2022-08-26

    申请号:CN202210790795.5

    申请日:2022-07-05

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高赤霞珠葡萄幼苗抗倒春寒冻害能力的方法,涉及葡萄种植技术领域。本发明通过对赤霞珠葡萄幼苗的叶面避光喷施褪黑素水溶液,所述褪黑素水溶液的浓度为50‑200μmol/L。本发明能够显著提高幼苗的抗倒春寒冻害能力,对幼苗叶片抗寒性鉴定,其活性氧伤害物质H2O2和O2.‑显著降低,且抗氧化酶SOD、POD、CAT活性显著提高。

    一种非组培依赖的葡萄种子高效遗传转化方法

    公开(公告)号:CN118006675B

    公开(公告)日:2025-04-04

    申请号:CN202410071900.9

    申请日:2024-01-18

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明公开了一种非组培依赖的葡萄种子高效遗传转化方法,涉及农业生物技术和植物基因工程领域。该遗传转化包括以下步骤:将葡萄种子消毒后进行皮切处理,之后预培养至腹部壳裂;将腹部壳裂的葡萄种子置于浸染液中进行浸染处理后种植于培养基质中,培养得到转基因葡萄植株;所述浸染液含有能够表达异源基因的重组工程菌株。本发明以葡萄种子作为试验材料,通过农杆菌介导的方法,将外源基因成功导入葡萄的基因组中,从而实现了葡萄的遗传转化,获得了转基因葡萄植株。本发明的转化方法有效克服了传统遗传转化技术的缺陷,可以在不依赖组织培养技术的基础上实现遗传转化,并且具有较高的转化效率和操作便捷性。

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