公开(公告)号：CN114940996B

公开(公告)日：2023-09-08

申请号：CN202210599276.0

申请日：2022-05-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吴寒 ,  翟常升 ,  马文尧 ,  薛娟

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/70 ,  C12N15/82 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种番茄SlULT1基因在提高番茄抗旱性中的应用，涉及番茄基因工程技术领域，该应用方法首先设计SlULT1基因的2个靶序列，然后将启动子连同包含2个靶点的sgRNA序列进行基因合成后，插入到CRISPR‑Cas9基因编辑载体的两个酶切位点之间，得到SlULT1基因编辑载体。构建的测序正确载体转入宿主细胞中，再利用其侵染番茄的子叶外植体，在阳性转基因番茄后代中筛选SlULT1基因突变但不包含基因编辑载体序列的番茄植株，获得抗旱性增强的番茄植株。为了便于对番茄植株进行鉴定及筛选，可对所使用的载体进行加工，如加入植物可选择性标记或具有抗性的抗生素标记物等。

公开(公告)号：CN114940996A

公开(公告)日：2022-08-26

申请号：CN202210599276.0

申请日：2022-05-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吴寒 ,  翟常升 ,  马文尧 ,  薛娟

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/70 ,  C12N15/82 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种番茄SlULT1基因在提高番茄抗旱性中的应用，涉及番茄基因工程技术领域，该应用方法首先设计SlULT1基因的2个靶序列，然后将启动子连同包含2个靶点的sgRNA序列进行基因合成后，插入到CRISPR‑Cas9基因编辑载体的两个酶切位点之间，得到SlULT1基因编辑载体。构建的测序正确载体转入宿主细胞中，再利用其侵染番茄的子叶外植体，在阳性转基因番茄后代中筛选SlULT1基因突变但不包含基因编辑载体序列的番茄植株，获得抗旱性增强的番茄植株。为了便于对番茄植株进行鉴定及筛选，可对所使用的载体进行加工，如加入植物可选择性标记或具有抗性的抗生素标记物等。