禾谷镰孢菌对多菌灵抗药性基因型的分型检测方法

    公开(公告)号:CN101988122A

    公开(公告)日:2011-03-23

    申请号:CN201010247073.2

    申请日:2010-08-06

    Abstract: 本发明属于禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)多菌灵抗性基因型的分子检测和SNP分型方法,可用于引起小麦赤霉病的禾谷镰孢菌对多菌灵等苯并咪唑类杀菌剂抗药性监测及抗药性基因型诊断。该检测方法共分3个主要步骤,(1)提取待测菌株的核基因组DNA;(2)运用三组引物对,进行PCR反应;(3)根据PCR产物电泳图谱鉴定菌株对多菌灵抗性的基因型。采用Tetra-primer ARMS PCR(Tetra-primer amplification refractory mutation system-PCR)技术可以快速、准确地检测出禾谷镰孢菌抗药性菌株及其基因型,并以此判断抗药性水平。检测准确率达95%以上。

    禾谷镰孢菌对多菌灵抗药性基因频率的高通量分子检测方法

    公开(公告)号:CN101985652B

    公开(公告)日:2013-04-24

    申请号:CN201010247003.7

    申请日:2010-08-06

    Abstract: 本发明属于禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对多菌灵抗药性基因频率的高通量分子检测方法,可用于小麦赤霉病菌的抗药性监测和抗药性病害流行的早期预警。本发明基于97%以上的禾谷镰孢菌对多菌灵的抗药性基因型属于β2-微管蛋白基因167位点突变的研究基础建立起来的一种抗药性高通量检测技术。该检测方法共分3个主要步骤,(1)分别提取已知敏感和抗药性菌株及待测样品的基因组DNA;(2)进行特异性实时定量PCR反应,建立标准曲线;(3)对照标准曲线求出测定样品中的抗药性基因频率。该方法具有高通量、快速、准确的特点。抗药性基因频率检出灵敏度可达万分之一至十万分之一,准确率达96%以上。

    禾谷镰孢菌对多菌灵抗药性基因频率的高通量分子检测

    公开(公告)号:CN101985652A

    公开(公告)日:2011-03-16

    申请号:CN201010247003.7

    申请日:2010-08-06

    Abstract: 本发明属于禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对多菌灵抗药性基因频率的高通量分子检测方法,可用于小麦赤霉病菌的抗药性监测和抗药性病害流行的早期预警。本发明基于97%以上的禾谷镰孢菌对多菌灵的抗药性基因型属于β2-微管蛋白基因167位点突变的研究基础建立起来的一种抗药性高通量检测技术。该检测方法共分3个主要步骤,(1)分别提取已知敏感和抗药性菌株及待测样品的基因组DNA;(2)进行特异性实时定量PCR反应,建立标准曲线;(3)对照标准曲线求出测定样品中的抗药性基因频率。该方法具有高通量、快速、准确的特点。抗药性基因频率检出灵敏度可达万分之一至十万分之一,准确率达96%以上。

    禾谷镰孢菌对多菌灵的中等抗性水平菌株的分子检测方法

    公开(公告)号:CN101985653B

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201010247027.2

    申请日:2010-08-06

    Abstract: 本发明属于禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对多菌灵产生中等抗性水平菌株的分子检测方法,可用于引起小麦赤霉病的禾谷镰孢菌对多菌灵的抗药性监测和流行预警。该检测方法共分3个主要步骤,(1)分别提取待测菌株的核基因组DNA;(2)运用内外引物对进行巢式PCR反应,获得目标片段;(3)将目标片段用限制性内切酶HindIII和TaaI(Tsp4CI)分别酶切,从酶切产物电泳图谱可以准确鉴定中等抗性菌株基因型。采用PIRA-PCR(Primer-introduced restriction analysis PCR)技术可以快速、准确地检测出田间中等抗药性禾谷镰孢菌的数量及其在群体中的比例。检测准确率达95%以上。

    禾谷镰孢菌对多菌灵抗药性基因型的分型检测方法

    公开(公告)号:CN101988122B

    公开(公告)日:2013-06-26

    申请号:CN201010247073.2

    申请日:2010-08-06

    Abstract: 本发明属于禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)多菌灵抗性基因型的分子检测和SNP分型方法,可用于引起小麦赤霉病的禾谷镰孢菌对多菌灵等苯并咪唑类杀菌剂抗药性监测及抗药性基因型诊断。该检测方法共分3个主要步骤,(1)提取待测菌株的核基因组DNA;(2)运用三组引物对,进行PCR反应;(3)根据PCR产物电泳图谱鉴定菌株对多菌灵抗性的基因型。采用Tetra-primer ARMS PCR(Tetra-primer amplification refractory mutation system-PCR)技术可以快速、准确地检测出禾谷镰孢菌抗药性菌株及其基因型,并以此判断抗药性水平。检测准确率达95%以上。

    禾谷镰孢菌对多菌灵的中等抗性水平菌株的分子检测方法

    公开(公告)号:CN101985653A

    公开(公告)日:2011-03-16

    申请号:CN201010247027.2

    申请日:2010-08-06

    Abstract: 本发明属于禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对多菌灵产生中等抗性水平菌株的分子检测方法,可用于引起小麦赤霉病的禾谷镰孢菌对多菌灵的抗药性监测和流行预警。该检测方法共分3个主要步骤,(1)分别提取待测菌株的核基因组DNA;(2)运用内外引物对进行巢式PCR反应,获得目标片段;(3)将目标片段用限制性内切酶HindIII和TaaI(Tsp4CI)分别酶切,从酶切产物电泳图谱可以准确鉴定中等抗性菌株基因型。采用PIRA-PCR(Primer-introduced restriction analysis PCR)技术可以快速、准确地检测出田间中等抗药性禾谷镰孢菌的数量及其在群体中的比例。检测准确率达95%以上。

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