公开(公告)号：CN107164414A

公开(公告)日：2017-09-15

申请号：CN201710492567.9

申请日：2017-06-26

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 成艳芬 ,  李袁飞 ,  朱伟云

IPC: C12P5/02 ,  C02F11/04

CPC classification number: Y02E50/343 ,  C12P5/023 ,  C02F11/04

Abstract: 本发明公开一种降解秸秆类原料厌氧发酵产沼气的方法，具体步骤如下：将秸秆类原料切碎至0.3~0.8厘米的片段；将切碎的片段加入到厌氧反应器中作为发酵物；向厌氧反应器发酵物中加入发酵缓冲液，所述发酵物与发酵缓冲液重量体积比为1：45~90；向厌氧反应器中接种接种物，所述发酵物与接种物的重量体积比为1：5~10，发酵物终浓度为1~2%；向厌氧反应器中加入氨苄青霉素，使其终浓度为1800‑2200 U/ml，同时控制反应温度为38‑40℃，发酵时间为48‑72小时即得沼气。与现有技术相比，本发明可有效的提高秸秆类原料产气沼量55%‑60%，且能提高其在累积产气量中的比例及单位秸秆类原料的沼气产量。

公开(公告)号：CN111748538B

公开(公告)日：2022-05-20

申请号：CN202010347625.0

申请日：2020-04-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 成艳芬 ,  施其成 ,  李袁飞 ,  朱伟云

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12P19/00

Abstract: 本申请公开了一种阿魏酸酯酶、突变体和应用，属于生物工程领域。本发明首先利用基因组学技术从厌氧真菌Neocallimastix sp.中成功筛选出一种阿魏酸酯酶基因，根据原核系统密码子使用的偏好性及阿魏酸酯酶基因的GC含量和mRNA的二级结构，对该阿魏酸酯酶基因进行密码子优化，得阿魏酸酯酶基因序列。该酶存在酯酶区和糖苷水解酶11区，对这两个区进行定点突变，得到的突变基因也在大肠杆菌中表达，分离纯化结果显示该阿魏酸酯酶及其突变体都成功地在大肠杆菌中表达，并且突变体的酯酶活性远低于未突变体，丰富了阿魏酸酯酶的菌种来源，在提高饲料纤维的消化率、改善动物生产性能方面具有理论上的指导意义。

公开(公告)号：CN111748538A

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN202010347625.0

申请日：2020-04-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 成艳芬 ,  施其成 ,  李袁飞 ,  朱伟云

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12P19/00

Abstract: 本申请公开了一种新型阿魏酸酯酶、突变体和应用，属于生物工程领域。本发明首先利用基因组学技术从厌氧真菌Neocallimastix sp.中成功筛选出一种阿魏酸酯酶基因，根据原核系统密码子使用的偏好性及阿魏酸酯酶基因的GC含量和mRNA的二级结构，对该阿魏酸酯酶基因进行密码子优化，得新型阿魏酸酯酶基因序列。该酶存在酯酶区和糖苷水解酶11区，对这两个区进行定点突变，得到的突变基因也在大肠杆菌中表达，分离纯化结果显示该新型阿魏酸酯酶及其突变体都成功地在大肠杆菌中表达，并且突变体的酯酶活性远低于未突变体，丰富了阿魏酸酯酶的菌种来源，在提高饲料纤维的消化率、改善动物生产性能方面具有理论上的指导意义。