番茄SlHMGA3基因在培育果实延迟成熟的番茄中的应用

    公开(公告)号:CN113684225B

    公开(公告)日:2023-09-08

    申请号:CN202110592538.6

    申请日:2021-05-28

    Inventor: 吴寒 李治飞 皮颖

    Abstract: 本发明公开了一种番茄SlHMGA3基因在培育果实延迟成熟的番茄中的应用,属于番茄基因工程技术领域,该应用方法先构建出番茄SlHMGA3基因CRISPR/Cas9表达载体;设计SlHMGA3基因的2个靶序列,然后将启动子连同包含2个靶点的sgRNA序列进行基因合成后,插入到载体的两个酶切位点之间,得到SlHMGA3基因突变载体。构建的测序正确载体转入宿主细胞中,再利用其侵染番茄的子叶外植体,在阳性转基因番茄后代中筛选SlHMGA3基因突变但不包含基因敲除载体序列的番茄植株,获得果实延迟成熟的番茄植株。为了便于对番茄植株进行鉴定及筛选,可对所使用的载体进行加工,如加入植物可选择性标记或具有抗性的抗生素标记物等。

    番茄SlHMGA3基因在培育果实延迟成熟的番茄中的应用

    公开(公告)号:CN113684225A

    公开(公告)日:2021-11-23

    申请号:CN202110592538.6

    申请日:2021-05-28

    Inventor: 吴寒 李治飞 皮颖

    Abstract: 本发明公开了一种番茄SlHMGA3基因在培育果实延迟成熟的番茄中的应用,属于番茄基因工程技术领域,该应用方法先构建出番茄SlHMGA3基因CRISPR/Cas9表达载体;设计SlHMGA3基因的2个靶序列,然后将启动子连同包含2个靶点的sgRNA序列进行基因合成后,插入到载体的两个酶切位点之间,得到SlHMGA3基因突变载体。构建的测序正确载体转入宿主细胞中,再利用其侵染番茄的子叶外植体,在阳性转基因番茄后代中筛选SlHMGA3基因突变但不包含基因敲除载体序列的番茄植株,获得果实延迟成熟的番茄植株。为了便于对番茄植株进行鉴定及筛选,可对所使用的载体进行加工,如加入植物可选择性标记或具有抗性的抗生素标记物等。

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