公开(公告)号：CN104293971B

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201410619316.9

申请日：2014-11-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 段亚冰 ,  周明国 ,  杨莹 ,  张晓柯 ,  王建新 ,  曹君红

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明公开了一种对多菌灵高抗灰葡萄孢菌株的快速检测方法，可用于引起作物灰霉病的灰葡萄孢菌对多菌灵的抗性群体的动态监测及流行预警。本发明是以环介导恒温扩增技术(LAMP)为基础建立起来的一种快速、便捷、特异性强、灵敏度高和成本低廉的分子检测技术。该检测方法通过在灰葡萄孢菌对多菌灵的高抗菌株的β微管蛋白上设计2对特异性引物，进行LAMP扩增，根据反应产物颜色判定是否为灰葡萄孢菌对多菌灵的高抗菌株。LAMP扩增产物显示为天蓝色，电泳图谱呈梯状条带，有产物扩增，鉴定为灰葡萄孢菌对多菌灵的高抗菌株；LAMP扩增产物显示为紫色，电泳图谱无条带，无产物扩增，鉴定为灰葡萄孢菌对多菌灵的非高抗菌株。本发明简便、快速、成本低，对作物灰霉病的抗性风险评估及合理用药具有重要的现实意义。

公开(公告)号：CN104928364A

公开(公告)日：2015-09-23

申请号：CN201510235864.6

申请日：2015-05-06

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 段亚冰 ,  周明国 ,  杨莹 ,  曹君红 ,  效雪梅 ,  施一渊

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了基于环介导恒温扩增技术检测多菌灵抗性基因型F200Y禾谷镰孢菌的方法及引物组合物。用于检测多菌灵抗性基因型F200Y禾谷镰孢菌的引物组合物，由SEQ ID NO.2所示的正向内引物FIP、SEQ ID NO.3所示的反向内引物BIP、SEQ ID NO.4所示的正向外引物F3、SEQ ID NO.5所示的反向外引物B3组成。本发明的检测方法简便易行、实用性好、灵敏度高、特异性强、准确性高、实现了恒温扩增，同时还为多菌灵抗性基因型F200Y禾谷镰孢菌的检测提供了新的技术平台，能够对禾谷镰孢菌的多菌灵抗性群体进行监测，及时了解抗性群体发展动态，本发明对小麦赤霉病的抗药性治理和科学指导用药，降低生产成本，减少农药的环境污染也具有重要意义。

公开(公告)号：CN104293971A

公开(公告)日：2015-01-21

申请号：CN201410619316.9

申请日：2014-11-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 段亚冰 ,  周明国 ,  杨莹 ,  张晓柯 ,  王建新 ,  曹君红

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119

Abstract: 本发明公开了一种对多菌灵高抗灰葡萄孢菌株的快速检测方法，可用于引起作物灰霉病的灰葡萄孢菌对多菌灵的抗性群体的动态监测及流行预警。本发明是以环介导恒温扩增技术(LAMP)为基础建立起来的一种快速、便捷、特异性强、灵敏度高和成本低廉的分子检测技术。该检测方法通过在灰葡萄孢菌对多菌灵的高抗菌株的β微管蛋白上设计2对特异性引物，进行LAMP扩增，根据反应产物颜色判定是否为灰葡萄孢菌对多菌灵的高抗菌株。LAMP扩增产物显示为天蓝色，电泳图谱呈梯状条带，有产物扩增，鉴定为灰葡萄孢菌对多菌灵的高抗菌株；LAMP扩增产物显示为紫色，电泳图谱无条带，无产物扩增，鉴定为灰葡萄孢菌对多菌灵的非高抗菌株。本发明简便、快速、成本低，对作物灰霉病的抗性风险评估及合理用药具有重要的现实意义。