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公开(公告)号：CN109706125B
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN201811107716.6
申请日：2018-09-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 蜡样芽孢杆菌噬菌体组合物及其应用，包括两株噬菌体，分别为噬菌体φYSZBA1，保藏编号为：CCTCC M 2018517，分类命名为Bacillus cereus phage φYSZBA1；噬菌体φYSZBA2，保藏编号为：CCTCC M 2018518，分类命名为Bacillus cereus phage φYSZBA2。本发明运用混合“鸡尾酒”疗法向污染土壤‑蔬菜体系中接种噬菌体混合物，定向侵染并灭活体系中抗性蜡样芽孢杆菌污染协同去除抗性基因的修复方式，修复结束后，抗性蜡样芽孢杆菌及其抗性基因大幅度消减，同时可以维持土壤生态环境功能多样性与稳定性。
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公开(公告)号：CN109923967A
公开(公告)日：2019-06-25
申请号：CN201910272896.1
申请日：2019-04-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01B79/02
Abstract: 一种生物质炭阻控蚓粪中复合抗性污染物的扩散传播方法，涉及农业环境工程技术领域。将生物质炭与蚓粪进行混匀，混合质量比为1:200~1:50，并静置至少7天，保持60%的田间持水量。抗性污染物是指抗生素、抗性致病菌与抗性基因。该方法填补了现有技术中缺乏一种有效阻控蚓粪中抗性污染物在蚓粪-土壤-作物过程的扩散传播技术的空白；本发明提供了适合多种抗生素、抗性致病菌和抗性基因污染的土壤，为减少蚓粪施用到农田土壤中导致的复合新污染提供高效广谱且绿色环保的阻控方法，可应用于农业尤其是施用畜禽有机肥（蚓粪）及农作物等产品质量安全领域。
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公开(公告)号：CN111069276B
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN201911418253.X
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京农业大学
IPC: B09C1/10
Abstract: 蚯蚓肠道内容物强化土壤中四环素类抗生素消减的方法，首先选取具有明显环带并且活力较强的新鲜蚯蚓，对其体表清洗后，投放至人工配制的四环素类污染土壤中，保持避光和常温培养14天后，取出蚯蚓，再次进行体表清洗，放在培养皿中清肠，解剖获取新鲜蚯蚓肠道内容物；采集实际环境中不同类型四环素污染土壤，去除土壤中的草根、树叶、石头等杂质，再对土壤进行破碎筛分；然后向土壤中添加蚯蚓肠道内容物，进行人工培养30‑60天后完成修复。蚯蚓肠道内容物中含有大量四环素类抗生素降解菌群，接种蚯蚓肠道内生细菌既有利于土壤中四环素类抗生素的深度消减，同时蚯蚓肠道内生细菌外排定殖在土壤中也有利于修复后土著微生物生态功能多样性的快速恢复。
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公开(公告)号：CN109182127A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811003600.8
申请日：2018-08-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 蚯蚓肠道可培养抗生素抗性细菌分离筛选与鉴定的方法，首先选取有明显环带并且体重在一定范围内的新鲜蚯蚓，对其体表进行清洗后进行麻醉处理，然后进行解剖，取其肠道内容物；使用无菌水将肠道内容物稀释成一定的浓度梯度，不同浓度的稀释液在含有不同种类及含量抗生素的改良LB固体平板上进行涂布，之后进行培养、筛菌、纯化。取纯化好的菌落于改良LB液体培养基中进行培养，培养完成后，用细菌DNA提取试剂盒提取DNA；将提取的DNA进行16S rRNA扩增，用质量百分浓度为2%的凝胶电泳检测扩增产物；将扩增产物进行测序分析，得到序列之后在NCBI上进行比对。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111069275B
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN201911409957.0
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 蚯蚓肠道内容物强化土壤中磺胺类抗生素消减的方法，首先选取成熟的且具有明显环带的新鲜蚯蚓，对其体表清洗后，放在培养皿中清肠，然后按比例添加到人工配制的磺胺类污染土壤中，在避光和室温的条件下培养2周后，取出蚯蚓并再次进行体表清洗，解剖获取新鲜蚯蚓肠道内容物；采集自然环境中受到磺胺类抗生素污染的不同类型的土壤，去除土壤中的草根、树叶、石头等杂质，对土壤进行破碎筛分；然后向不同磺胺类抗生素污染土壤中按比例添加蚯蚓肠道内容物，进行人工培养1‑2月后完成修复。蚯蚓肠道内容物中含有高丰度的磺胺类抗生素降解菌群，外源添加肠道内容物不但对土壤中磺胺类抗生素的降解去除具有显著的效果，而且有利于修复后土著微生物生态功能多样性快速恢复。
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公开(公告)号：CN111069275A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911409957.0
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 蚯蚓肠道内容物强化土壤中磺胺类抗生素消减的方法，首先选取成熟的且具有明显环带的新鲜蚯蚓，对其体表清洗后，放在培养皿中清肠，然后按比例添加到人工配制的磺胺类污染土壤中，在避光和室温的条件下培养2周后，取出蚯蚓并再次进行体表清洗，解剖获取新鲜蚯蚓肠道内容物；采集自然环境中受到磺胺类抗生素污染的不同类型的土壤，去除土壤中的草根、树叶、石头等杂质，对土壤进行破碎筛分；然后向不同磺胺类抗生素污染土壤中按比例添加蚯蚓肠道内容物，进行人工培养1-2月后完成修复。蚯蚓肠道内容物中含有高丰度的磺胺类抗生素降解菌群，外源添加肠道内容物不但对土壤中磺胺类抗生素的降解去除具有显著的效果，而且有利于修复后土著微生物生态功能多样性快速恢复。
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公开(公告)号：CN111069276A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911418253.X
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京农业大学
IPC: B09C1/10
Abstract: 蚯蚓肠道内容物强化土壤中四环素类抗生素消减的方法，首先选取具有明显环带并且活力较强的新鲜蚯蚓，对其体表清洗后，投放至人工配制的四环素类污染土壤中，保持避光和常温培养14天后，取出蚯蚓，再次进行体表清洗，放在培养皿中清肠，解剖获取新鲜蚯蚓肠道内容物；采集实际环境中不同类型四环素污染土壤，去除土壤中的草根、树叶、石头等杂质，再对土壤进行破碎筛分；然后向土壤中添加蚯蚓肠道内容物，进行人工培养30-60天后完成修复。蚯蚓肠道内容物中含有大量四环素类抗生素降解菌群，接种蚯蚓肠道内生细菌既有利于土壤中四环素类抗生素的深度消减，同时蚯蚓肠道内生细菌外排定殖在土壤中也有利于修复后土著微生物生态功能多样性的快速恢复。
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公开(公告)号：CN110904057A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911409962.1
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 一种土壤中噬菌体提取富集的方法，首先将鲜土以一定比例与柠檬酸钾缓冲液混合，放置于低温孵化一段时间，然后提取液将通过超声震荡处理从土壤颗粒中提取土壤噬菌体。土壤悬浊液经多次离心操作后取得上清液，经灭菌滤膜依次过滤除菌后，使用切向流过滤/超滤技术缩小滤液体积，进行噬菌体富集。使用聚乙二醇沉淀的方式回收噬菌体，低温放置过夜，第二天经离心、TE缓冲液溶解后再次过滤膜除菌，使用核酸酶消化样品中的杂质DNA和RNA。最终得到的浓缩液可以进行后续DNA提取及样品固定等操作。
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公开(公告)号：CN110899315A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911118394.X
申请日：2019-11-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 石煤冶炼区多环芳烃与钒复合污染土壤增效淋洗液及其应用，先对污染土壤颗粒进行破碎筛分；再将土粒置于土壤多元异位淋洗修复设备中，加入大豆油与氨基β环糊精复配混合淋洗液，同时采用超声强化和升温处理的方式，进行连续异位增效淋洗；再对淋洗后土壤接种龙葵，施加等同于土壤质量0.5%-2%的营养源缓冲液；人工培养生长完成修复。该方法可同时高效淋洗去除土壤中的多环芳烃与钒等有机-无机复合污染物；接种龙葵和添加外源营养物质，既有利于淋洗后土壤中残留态多环芳烃的深度降解，也有利于淋洗后土壤环境微生物生态功能多样性的快速恢复。
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