公开(公告)号：CN118546997A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410802989.1

申请日：2024-06-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王振兴 ,  慈惠婷 ,  谢炘言 ,  宋爱萍 ,  陈发棣 ,  张静 ,  孙艳艳

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/113 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/14

Abstract: 本发明公开了一种提高甘野菊CRISPR/Cas9基因编辑效率的方法，属于基因工程技术领域。本发明公开的提高甘野菊CRISPR/Cas9基因编辑效率的方法，选择携带有CRISPR/Cas9表达盒，但是目的基因未被完全编辑的甘野菊茎段为材料，进行37℃/30h、22℃/42h，3个循环的热激处理，提高茎段再生芽中靶基因编辑效率。结果表明，NRPD1基因编辑率为0的株系经过热激循环处理后，15株材料均有1％～55％不等比例的基因编辑效率提升。基因编辑率为0的株系经过热激循环处理后，提高了Cs DRM1的编辑效率，最高基因编辑率达到100％。

公开(公告)号：CN116024255B

公开(公告)日：2024-03-19

申请号：CN202210812008.2

申请日：2022-07-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 宋爱萍 ,  张佳丽 ,  王振兴 ,  袁叶 ,  慈惠婷 ,  房伟民 ,  陈发棣

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/54 ,  A01H5/00 ,  A01H6/14 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种利用不定芽体外再生提高菊属植物基因编辑效率的方法，包括以下步骤：将CRISPR/Cas9基因编辑菊属植物的幼叶的叶盘经过不定芽再生培养获得不定芽，再将不定芽切下接种到生根培养基上进行生根培养得到再生植株。本发明通过构建含有编辑CsDRM1基因的载体，利用叶盘转化法获得基因编辑植株，再利用不定芽体外再生的方式将基因编辑效率从≤50％提升至100％，此方法具有操作简单，效果显著等优点，为基因编辑发展提供新方法，具有较高的实用性和科研应用价值。

公开(公告)号：CN116024255A

公开(公告)日：2023-04-28

申请号：CN202210812008.2

申请日：2022-07-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 宋爱萍 ,  张佳丽 ,  王振兴 ,  袁叶 ,  慈惠婷 ,  房伟民 ,  陈发棣

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/54 ,  A01H5/00 ,  A01H6/14 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种利用不定芽体外再生提高菊属植物基因编辑效率的方法，包括以下步骤：将CRISPR/Cas9基因编辑菊属植物的幼叶的叶盘经过不定芽再生培养获得不定芽，再将不定芽切下接种到生根培养基上进行生根培养得到再生植株。本发明通过构建含有编辑CsDRM1基因的载体，利用叶盘转化法获得基因编辑植株，再利用不定芽体外再生的方式将基因编辑效率从≤50％提升至100％，此方法具有操作简单，效果显著等优点，为基因编辑发展提供新方法，具有较高的实用性和科研应用价值。