公开(公告)号：CN111826366A

公开(公告)日：2020-10-27

申请号：CN202010503288.X

申请日：2020-06-05

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  黄丽芳 ,  苑歆 ,  刘光毅 ,  何贤蓉 ,  侯轶 ,  樊壬水

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/6851 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种直扩型热启动DNA聚合酶及其制备方法与应用。本发明公开的直扩型热启动DNA聚合酶是野生型Taq DNA聚合酶经缺失、定点突变、融合非特异性双链DNA结合蛋白结构域生物突变，并用化学修饰改造而成。本发明直扩型热启动DNA聚合酶可大幅提高DNA聚合酶稳定性，可耐受高浓度的荧光染料和各种抑制剂，可应用于各种来源、组成复杂样本的直接PCR或qPCR检测，使得PCR相关反应和检测更加便利。本发明还公开了一种qPCR反应试剂盒，检测特异性高、荧光信号强，适用于低含量粗提取核酸的快速定量检测，可应用于食品掺杂、微生物检测、转基因植物筛查。

公开(公告)号：CN109022387A

公开(公告)日：2018-12-18

申请号：CN201810999861.3

申请日：2018-08-29

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  黄丽芳 ,  刘光毅 ,  黄菁菁 ,  侯轶

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/686 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种突变型Pfu DNA聚合酶及其制备方法与应用。该突变型Pfu DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该突变型Pfu DNA聚合酶大幅提高了DNA聚合酶的扩增速率、延伸能力和保真性，适用于各类常规PCR、高保真PCR、长片段PCR及高GC模板的PCR。同时，该突变型Pfu DNA聚合酶对血液中存在的PCR抑制剂具有很高的耐受性，可直接利用血液样品进行PCR检测，无需事先提纯DNA，节约了时间且避免了核酸提取过程中的交叉污染现象。本发明的突变型Pfu DNA聚合酶适合在抗凝血或常规滤纸收集的血液中直接扩增DNA，适用于基因型疾病诊断和亲子鉴定分析。

公开(公告)号：CN109022387B

公开(公告)日：2020-12-22

申请号：CN201810999861.3

申请日：2018-08-29

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  黄丽芳 ,  刘光毅 ,  黄菁菁 ,  侯轶

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/686 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种突变型Pfu DNA聚合酶及其制备方法与应用。该突变型Pfu DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该突变型Pfu DNA聚合酶大幅提高了DNA聚合酶的扩增速率、延伸能力和保真性，适用于各类常规PCR、高保真PCR、长片段PCR及高GC模板的PCR。同时，该突变型Pfu DNA聚合酶对血液中存在的PCR抑制剂具有很高的耐受性，可直接利用血液样品进行PCR检测，无需事先提纯DNA，节约了时间且避免了核酸提取过程中的交叉污染现象。本发明的突变型Pfu DNA聚合酶适合在抗凝血或常规滤纸收集的血液中直接扩增DNA，适用于基因型疾病诊断和亲子鉴定分析。