公开(公告)号：CN115747254A

公开(公告)日：2023-03-07

申请号：CN202211216537.2

申请日：2022-09-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈亮 ,  杨明康 ,  朱晓洁 ,  黄巍

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/53 ,  C12N15/62 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明提供一种利用荧光素酶报告基因检测植物自噬活性的方法，属于植物生物技术领域。首先构建植物表达载体，所述表达载体的构建方法为将萤火虫荧光素酶基因LUC分成N端和C端两个部分，将C端与拟南芥自噬基因ATG8a融合，而N端与拟南芥自噬受体基因NBR1融合，构建成cLUC‑ATG8a/NBR1‑nLUC表达载体。通过农杆菌转化将表达载体转化到拟南芥植株。使用酶标仪检测阳性转化幼苗的发光强度，即可评估植物的自噬活性，发光强度和自噬活性呈负相关的关系。本发明提供了一种新的植物自噬活性检测的方法，具有信噪比高，检测通量高，操作简便的优点。

公开(公告)号：CN105985980A

公开(公告)日：2016-10-05

申请号：CN201510083801.3

申请日：2015-02-13

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 庄楚雄 ,  周海 ,  陈亮 ,  姜大刚 ,  李静

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/55 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了一种利用ZFN系统定点突变RNase ZS1获得温敏不育系的方法，其根据RNase ZS1在水稻的TMS5或Os02g0214300或LOC_Os02g12290编码区分别设计左、右两侧的ZFN识别序列ZFN-L和ZFN-R，然后构建双元载体，遗传转化获得阳性转基因植株，在阳性转基因植株中筛选获得突变的植株，将突变的植株传代种植和分离，获得不带转基因成分且低温下育性恢复可育的植株作为温敏不育株等步骤。通过ZFN系统定点突变失活RNase ZS1蛋白，实现人工培育可以获得不带转基因成分的温敏不育系，具有目的性强，基因组损伤小，不带转基因成分，大大简化了生物安全评价过程。

公开(公告)号：CN104651393A

公开(公告)日：2015-05-27

申请号：CN201510009577.3

申请日：2015-01-06

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 周海 ,  庄楚雄 ,  陈亮 ,  李静 ,  姜大刚

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了一种利用TALEN系统定点突变RNase ZS1培育水稻温敏不育系的方法，其包括靶标序列设计；将左、右侧TALE识别序列转化成识别模块；构建含识别模块的TALEN载体；合成含TALEN-L和TALEN-R的双元载体；遗传转化获得阳性转基因植株；选择阳性转基因植株中获得突变的植株；将突变的植株传代种植和分离，获得不带转基因成分但低温下育性恢复可育的植株作为温敏不育株等步骤。通过TALEN系统定点突变失活RNase ZS1蛋白的活性，实现人工培育可以获得不带转基因成分的温敏不育系，具有目的性强，基因组损伤小，规避了转基因带来的可能风险。

公开(公告)号：CN118853687A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202410836972.8

申请日：2024-06-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 齐华 ,  邬文萱 ,  陈亮 ,  周顺康 ,  聂新星 ,  谢丽娟 ,  仇荣亮

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/82 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/11 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 拟南芥ATG基因在调控植物砷胁迫抗性中的应用。本发明鉴定获得了拟南芥ATG5、ATG7和ATG10基因的纯合突变体，所述拟南芥ATG5、ATG7和ATG10基因纯合突变体atg5、atg7和atg10表现为，在砷酸盐暴露下，根长及叶绿素含量均高于野生型植物，活性氧的积累显著低于野生型植物，具有良好的砷酸盐耐受性。本发明通过实验确认了敲除拟南芥ATG基因在提高植物砷胁迫抗性方面具有潜在的应用价值，并为利用拟南芥ATG基因培育抗砷、高产的农作物品种奠定了良好的理论和应用基础。

公开(公告)号：CN116836990A

公开(公告)日：2023-10-03

申请号：CN202210301601.0

申请日：2022-03-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 黄巍 ,  林创烈 ,  陈亮

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了拟南芥COL4基因在提高植物UV‑B抗性中的应用。本发明通过基因工程技术获得了拟南芥COL4基因的过量表达载体，并由此获得了拟南芥的过量表达株系，经过筛选后最终获得拟南芥COL4基因过量表达纯合株系；所述拟南芥COL4基因过量表达纯合株系表现为UV‑B照射条件下花青素积累增多，根部生长优于野生型，具有很好的UV‑B抗性。本发明通过实验确认了拟南芥COL4基因在提高植物UV‑B抗性方面具有潜在的应用价值，并为利用拟南芥COL4基因培育抗UV‑B、高产的农作物品种奠定良好的理论和应用基础。

公开(公告)号：CN104651393B

公开(公告)日：2018-07-31

申请号：CN201510009577.3

申请日：2015-01-06

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 周海 ,  庄楚雄 ,  陈亮 ,  李静 ,  姜大刚

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明公开了种利用TALEN系统定点突变RNase Z培育水稻温敏不育系的方法,其包括靶标序列设计;将左、右侧TALE识别序列转化成识别模块;构建含识别模块的TALEN载体;合成含TALEN‑L和TALEN‑R的双元载体;遗传转化获得阳性转基因植株;选择阳性转基因植株中获得突变的植株;将突变的植株传代种植和分离,获得不带转基因成分但低温下育性恢复可育的植株作为温敏不育株等步骤。通过TALEN系统定点突变失活RNase Z蛋白的活性,实现人工培育可以获得不带转基因成分的温敏不育系,具有目的性强,基因组损伤小,规避了转基因带来的可能风险。

公开(公告)号：CN104293827A

公开(公告)日：2015-01-21

申请号：CN201410496037.8

申请日：2014-09-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 周海 ,  庄楚雄 ,  陈亮 ,  李静 ,  姜大刚

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/84 ,  C12Q1/68 ,  A01H5/00 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种定点突变RNase ZS1获得温敏不育系的方法，其包括根据RNase ZS1设计靶标序列的步骤；和构建含靶标序列片段的pU3-gRNA载体的步骤；和构建含靶标序列片段的pCRISPR/Cas9载体的步骤；和获得转基因苗的步骤；和突变位点的鉴定步骤；以及获得不带转基因成分的温敏不育系的步骤。本发明的方法彻底的失活了RNase ZS1蛋白的活性，实现人工培育不带转基因成分的温敏不育系，同时与利用化学、物理诱变获得的突变体没有本质的区别，具有目的性强，基因组的损伤小，规避了转基因带来的可能风险。