公开(公告)号：CN106834282A

公开(公告)日：2017-06-13

申请号：CN201611097132.6

申请日：2016-12-02

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 郭霄峰 ,  莫炜钰 ,  罗均 ,  田钦 ,  王怡飞 ,  莫梅君 ,  陈昊 ,  赵静 ,  胡立立

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12N15/11 ,  C12N15/1096 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种分段扩增猪流行性腹泻病毒全基因的引物组及方法。所述引物组包括22个引物对，各引物对上下游引物依次如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.44所示。所述方法为提取PEDV总RNA，反转成cDNA，用所述引物组进行PCR扩增反应，将PCR产物连接克隆载体，选取阳性克隆，DNA测序鉴定，最后拼接序列，得到PEDV全基因组序列。本发明通过设计22对引物组对PEDV进行全覆盖式地扩增，将庞大的基因组细分为多段，可便于定点研究特定区段的核苷酸变化，包括位点突变、核苷酸插入与缺失等，以更好把握PEDV基因的变化动态，了解毒株的变化，为解决该病提供准确的分子信息。

公开(公告)号：CN106967691A

公开(公告)日：2017-07-21

申请号：CN201710087252.6

申请日：2017-02-17

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 郭霄峰 ,  吴玉婷 ,  罗均 ,  张博越 ,  田钦

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/66 ,  A61K39/205 ,  A61P31/14

CPC classification number: C12N7/00 ,  A61K39/12 ,  C07K14/5412 ,  C12N15/66 ,  C12N2760/20121 ,  C12N2760/20134

Abstract: 本发明公开了一种携带免疫增强因子白介素6基因的重组狂犬病病毒rHEP‑CaIL6及其应用。该重组病毒是以狂犬病病毒HEP‑Flury株为骨架，将犬的IL6基因插入HEP‑Flury的G和L基因之间，得到重组质粒pHEP‑CaIL6，最后拯救筛选获得重组狂犬病病毒株rHEP‑CaIL6。该重组病毒携带免疫增强因子，能够增强免疫应答，诱导产生更高的抗狂犬病病毒中和抗体，更好的保护机体抵抗致死性狂犬病毒的攻击；可以以较低剂量产生具有保护力的中和抗体，降低了犬用疫苗的成本。而且，本发明将IL6基因重组至狂犬病毒中，既能稳定表达IL6蛋白，又能避免其过度表达，克服了过量IL6引起病理损伤的缺陷。

公开(公告)号：CN104911195A

公开(公告)日：2015-09-16

申请号：CN201510267860.6

申请日：2015-05-22

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 郭霄峰 ,  何飞龙 ,  江飙 ,  田钦 ,  梅明珠 ,  杨先锋

IPC: C12N15/47 ,  C07K14/145 ,  C07K16/10 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了经修饰的狂犬病病毒的基质蛋白基因MN，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；该基质蛋白基因MN表达得到的经修饰的狂犬病病毒的基质蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述狂犬病病毒为狂犬病病毒（rabies virus，RV）HEP-Flury株。利用上述修饰的狂犬病病毒HEP-Flury株基质蛋白基因MN构建重组质粒载体，进行表达以及单克隆抗体的制备，该单克隆抗体能特异性识别狂犬病病毒基质蛋白和狂犬病病毒，可以应用于间接ELISA方法、Western-blotting试验和间接免疫荧光试验，用于检测狂犬病病毒，具有良好的敏感性和特异性。