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公开(公告)号：CN107118373A
公开(公告)日：2017-09-01
申请号：CN201710391475.1
申请日：2017-05-27
Applicant: 湖北大学 , 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Abstract: 本发明涉及一种POSS‑PEG杂化水凝胶的制备方法，包括以下步骤：将4‑arm‑PEG‑MAL与POSS‑SH进行Michael加成反应得到POSS‑PEG预聚物；使用基质金属蛋白酶底物肽作为交联剂与POSS‑PEG预聚物通过Micheal加成反应交联成胶，得到POSS‑PEG杂化水凝胶。本发明的POSS‑PEG杂化水凝胶机械强度好，且其机械强度可通过改变4‑arm‑PEG‑MAL分子量、POSS‑SH与4‑arm‑PEG‑MAL的摩尔比例进行精细调控，同时只需在低浓度的三乙醇胺缓冲液中制备而成，成胶时间很快，在保证基本的理化性质的前提下尽可能地降低了对其上搭载的种子细胞或药物的损害或损失。
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公开(公告)号：CN107118373B
公开(公告)日：2019-06-18
申请号：CN201710391475.1
申请日：2017-05-27
Applicant: 湖北大学 , 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Abstract: 本发明涉及一种POSS‑PEG杂化水凝胶的制备方法，包括以下步骤：将4‑arm‑PEG‑MAL与POSS‑SH进行Michael加成反应得到POSS‑PEG预聚物；使用基质金属蛋白酶底物肽作为交联剂与POSS‑PEG预聚物通过Micheal加成反应交联成胶，得到POSS‑PEG杂化水凝胶。本发明的POSS‑PEG杂化水凝胶机械强度好，且其机械强度可通过改变4‑arm‑PEG‑MAL分子量、POSS‑SH与4‑arm‑PEG‑MAL的摩尔比例进行精细调控，同时只需在低浓度的三乙醇胺缓冲液中制备而成，成胶时间很快，在保证基本的理化性质的前提下尽可能地降低了对其上搭载的种子细胞或药物的损害或损失。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107881147A
公开(公告)日：2018-04-06
申请号：CN201711342026.4
申请日：2017-12-14
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Inventor： 董念国 , 刘保庆 , 李飞 , 尚小珂 , 史峰 , 邱雪峰 , 史嘉玮 , 陈思 , 吴龙 , 刘隽炜 , 刘义华 , 胡行健 , 洪昊 , 李华东 , 孙永丰 , 乔韡华 , 张超 , 王寅 , 李庚 , 朱鹏 , 刘名 , 耿冰川 , 代金池 , 白鹏 , 姜烨凡
IPC: C12N5/077
CPC classification number: C12N5/0657 , C12N2500/30 , C12N2509/00 , C12N2533/32 , C12N2533/52 , C12N2533/54
Abstract: 本发明公开了一种用于心肌细胞分离提纯的试剂盒及使用方法，涉及生物细胞培养技术领域，试剂盒包括第一试剂混合物、第二试剂混合物和第三试剂混合物，其中：第一试剂混合物包括7.012-8.007份Nacl，0.395-0.403份Kcl，0.123-0.222份MgSO4.7H2O，0.973-1.046份葡萄糖，0.060-0.077份KH2PO4，0.042-0.071份Na2HPO4，4.766-5.958份4-羟乙基哌嗪乙磺酸；第二试剂混合物包括超纯水、Percoll液和缓冲液，其体积比为1：3：1；第三试剂混合物包括超纯水、Percoll液和缓冲液，其体积比为2：2：1。采用本发明的试剂盒进行心肌原代细胞分离提纯，大大缩短心肌细胞提纯耗时。且心肌细胞与非心肌细胞分离效果更佳，心肌细胞纯度更高。
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公开(公告)号：CN107881146A
公开(公告)日：2018-04-06
申请号：CN201711340838.5
申请日：2017-12-14
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Inventor： 董念国 , 刘保庆 , 李飞 , 尚小珂 , 史峰 , 邱雪峰 , 史嘉玮 , 陈思 , 吴龙 , 刘隽炜 , 刘义华 , 胡行健 , 洪昊 , 李华东 , 孙永丰 , 乔韡华 , 张超 , 王寅 , 李庚 , 朱鹏 , 刘名 , 代金池 , 白鹏 , 姜烨凡
IPC: C12N5/077
CPC classification number: C12N5/0657 , C12N2500/30 , C12N2509/00 , C12N2533/32 , C12N2533/52 , C12N2533/54
Abstract: 本发明公开了一种心肌细胞分离提纯方法，涉及生物细胞培养技术领域，S1，将配好的包被液加入于六孔板中孵育；S2，将心肌缓冲液加入培养皿中，取心脏置于装有心肌缓冲液的培养皿中漂洗；S3，剪下的心脏组织置于装有心肌缓冲液的离心管中；S4，将0.05％Ⅱ型胶原酶加入离心管中，摇床培养，弃上清；S5，将0.1％Ⅱ型胶原酶加入步骤S4处理后的离心管中，摇床培养，取上清放入装有血清的离心管中混匀；S6，上清混匀后过滤、离心，离心后用心肌缓冲液重悬，将细胞悬液加入离心管中；S7，将细胞悬液缓慢加入配好的密度梯度液中，进行离心；S8，将吸出的中间层置于离心管中，进行离心，离心后重悬，计数后加入步骤S1处理后的六孔板培养。
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公开(公告)号：CN108165525A
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201711340953.2
申请日：2017-12-14
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Inventor： 董念国 , 刘保庆 , 李飞 , 尚小珂 , 史峰 , 邱雪峰 , 史嘉玮 , 陈思 , 吴龙 , 刘隽炜 , 刘义华 , 胡行健 , 洪昊 , 李华东 , 孙永丰 , 乔韡华 , 李庚 , 朱鹏 , 李光周 , 王怡轩 , 刘发远 , 谢飞 , 刘名 , 刘春耕 , 黄玉明
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种用于心肌细胞分离提纯的密度梯度液试剂盒及使用方法，涉及生物细胞培养技术领域，试剂盒包括第一试剂、第二试剂，其中：第一试剂包括超纯水、Percoll液和缓冲液，其体积比为1：3：1；第二试剂包括超纯水、Percoll液和缓冲液，其体积比为2：2：1；第一试剂和第二试剂中的缓冲液包括35.064‑40.032份Nacl，1.975‑2.013份Kcl，0.615‑1.107份MgSO4.7H2O，4.865‑5.226份葡萄糖，0.301‑0.384份KH2PO4，0.213‑0.365份Na2HPO4，23.830‑29.788份4‑羟乙基哌嗪乙磺酸。
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公开(公告)号：CN111560345A
公开(公告)日：2020-08-21
申请号：CN201910388100.9
申请日：2019-05-10
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Inventor： 李飞 , 董念国 , 吴龙 , 刘保庆 , 刘名 , 尚小珂 , 史峰 , 邱雪峰 , 史嘉玮 , 刘隽炜 , 胡行健 , 洪昊 , 王寅 , 李华东 , 孙永丰 , 张超 , 乔韡华 , 蔡子文 , 李睿
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种猪原代瓣膜内皮细胞分离纯化方法，包括以下步骤：步骤1、前期准备，将医疗器械和细胞培养基准备好；步骤2、包被将配好的包被液分别加入培养皿中，37℃孵育至少1小时，种细胞前PBS清洗3次；步骤3、取瓣膜组织无菌环境下剪取猪瓣膜组织，置入4℃预冷无菌肝素生理盐水中冲洗干净；步骤4、通过配置的密度梯度液，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。本发明具备以下有益效果：本发明的猪原代瓣膜内皮细胞分离纯化方法历时约2h，极大的提高了瓣膜内皮细胞分离纯化效率，且3-4h后即可观测到内皮细胞呈旋涡状或铺路石样排列、生长；免疫荧光显示内皮细胞纯度达95％以上，且简便、易操作。
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公开(公告)号：CN108004205A
公开(公告)日：2018-05-08
申请号：CN201711342017.5
申请日：2017-12-14
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Inventor： 董念国 , 刘保庆 , 李飞 , 尚小珂 , 史峰 , 邱雪峰 , 史嘉玮 , 陈思 , 吴龙 , 刘隽炜 , 刘义华 , 胡行健 , 洪昊 , 李华东 , 孙永丰 , 乔韡华 , 李庚 , 朱鹏 , 李光周 , 王怡轩 , 耿冰川 , 刘发远 , 谢飞 , 刘名 , 刘春耕 , 黄玉明
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种用于心肌细胞分离提纯的心肌缓冲液试剂盒及使用方法，涉及生物细胞培养技术领域，试剂盒包括心肌缓冲粉末，心肌缓冲粉末包括7.012-8.007份Nacl，0.395-0.403份Kcl，0.123-0.222份MgSO4.7H2O，0.973-1.046份葡萄糖，0.060-0.077份KH2PO4，0.042-0.071份Na2HPO4，4.766-5.958份4-羟乙基哌嗪乙磺酸。采用本发明的试剂盒进中心肌缓冲粉末为低钙粉末，不含有胰酶或添加化学抑制剂，避免了胰酶化学抑制剂对心肌细胞的损伤，适宜于保持心肌细胞活性，因此，采用本发明的试剂盒可最大程度上保证了心肌细胞的活性，细胞存活率更高。
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