公开(公告)号：CN108456690A

公开(公告)日：2018-08-28

申请号：CN201810317001.7

申请日：2018-04-10

Applicant: 华中科技大学

Inventor： 栗茂腾 ,  张凯 ,  付春华 ,  尹永泰 ,  李怀鑫 ,  聂丽逻 ,  程琦琪 ,  亓福玉 ,  邹大山

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H4/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开了一种甘蓝型油菜高效遗传转化及快速鉴定方法，其中甘蓝型油菜遗传转化方法包括以下步骤：(1)无菌外植体的培养；(2)目的载体的制备；(3)农杆菌转化液的制备；(4)农杆菌与下胚轴共培养；(5)诱导外植体脱分化形成愈伤组织；(6)诱导愈伤组织再分化形成芽；(7)转基因阳性筛选；(8)生根培养；(9)小苗炼苗移栽。本发明通过对遗传转化方法的整体流程设置、关键步骤的参数条件等进行改进及进一步优选，与现有技术相比利用有效的筛选手段能够高效、快速获取甘蓝型油菜转基因苗，本发明将DsRed基因插入到含有目的基因的载体中，得到带有DsRed的目的载体转入农杆菌菌株，通过观察下胚轴的颜色能够快速高效的进行转基因阳性筛选。

公开(公告)号：CN108456690B

公开(公告)日：2020-08-28

申请号：CN201810317001.7

申请日：2018-04-10

Applicant: 华中科技大学

Inventor： 栗茂腾 ,  张凯 ,  付春华 ,  尹永泰 ,  李怀鑫 ,  聂丽逻 ,  程琦琪 ,  亓福玉 ,  邹大山

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H4/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开了一种甘蓝型油菜高效遗传转化及快速鉴定方法，其中甘蓝型油菜遗传转化方法包括以下步骤：(1)无菌外植体的培养；(2)目的载体的制备；(3)农杆菌转化液的制备；(4)农杆菌与下胚轴共培养；(5)诱导外植体脱分化形成愈伤组织；(6)诱导愈伤组织再分化形成芽；(7)转基因阳性筛选；(8)生根培养；(9)小苗炼苗移栽。本发明通过对遗传转化方法的整体流程设置、关键步骤的参数条件等进行改进及进一步优选，与现有技术相比利用有效的筛选手段能够高效、快速获取甘蓝型油菜转基因苗，本发明将DsRed基因插入到含有目的基因的载体中，得到带有DsRed的目的载体转入农杆菌菌株，通过观察下胚轴的颜色能够快速高效的进行转基因阳性筛选。