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公开(公告)号:CN112662738B
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202011645412.2
申请日:2020-12-31
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6841 , C12Q1/682 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种用于核酸原位杂交信号放大的单链DNA制备方法,属于分子生物学技术领域。所述制备方法包括:以基因识别引物、第一磷酸化环化引物和DNA连接酶为原料,进行连接反应;连接反应完成后加入Bst DNA聚合酶和dNTP,进行滚环扩增反应,反应温度为45‑55℃,反应时间为1‑3h,获得用于核酸原位杂交信号放大的单链DNA;其中,所述第一磷酸化环化引物包含片段C,所述C的局部片段与第一荧光探针的核酸片段序列相同;或者,所述C的局部片段与二级放大单链DNA的局部片段核苷酸序列相同。该方法具有经济实用、步骤简单和灵敏度高的优点。本发明还提供一种用于核酸原位杂交信号二级放大的单链DNA制备方法。
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公开(公告)号:CN118726344A
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202310346953.2
申请日:2023-03-31
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/6841
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及经优化的SNAIL及其在mRNA原位成像分析中的用途。本发明提供了一种经过优化的SNAIL探针结构,通过单组SNAIL探针就实现以往需要4组甚至更多的探针才能实现的检出率。因此可将探针减少至一对,从而实现成本的最大化节约、最高效的检测分析;通过采用编码组合策略,对多重(>100种)基因实现编码与高效FISH检测。
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公开(公告)号:CN112662738A
公开(公告)日:2021-04-16
申请号:CN202011645412.2
申请日:2020-12-31
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6841 , C12Q1/682 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种用于核酸原位杂交信号放大的单链DNA制备方法,属于分子生物学技术领域。所述制备方法包括:以基因识别引物、第一磷酸化环化引物和DNA连接酶为原料,进行连接反应;连接反应完成后加入Bst DNA聚合酶和dNTP,进行滚环扩增反应,反应温度为45‑55℃,反应时间为1‑3h,获得用于核酸原位杂交信号放大的单链DNA;其中,所述第一磷酸化环化引物包含片段C,所述C的局部片段与第一荧光探针的核酸片段序列相同;或者,所述C的局部片段与二级放大单链DNA的局部片段核苷酸序列相同。该方法具有经济实用、步骤简单和灵敏度高的优点。本发明还提供一种用于核酸原位杂交信号二级放大的单链DNA制备方法。
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