公开(公告)号：CN116445480A

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202210020985.9

申请日：2022-01-10

Applicant: 十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)

Inventor： 孟忠吉 ,  程彬 ,  兰婷钰

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  A61K31/7088 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明提供了一种特异性靶向HBV的核酸分子及其表达盒、表达载体和转化子，所述核酸分子包括：(a)编码shRNA的核苷酸序列，如SEQ ID NO.1所示；(b)编码sgRNA1的核苷酸序列，如SEQ ID NO.2所示；(c)编码sgRNA2的核苷酸序列，如SEQ ID NO.3所示；和(d)编码Cas9的核苷酸序列；所述shRNA、sgRNA1、sgRNA2和Cas9分别位于4个翻译读框中。本发明将CRISPR/Cas9和RNAi两个系统整合到一个表达载体上，一方面，可保证每个细胞里Cas9蛋白和shRNA表达水平一致，四个表达盒之间的表达效率不会相互影响，可达到最高表达水平，从而对靶基因起到最大的抑制效率；另一方面，shRNA和双靶位CRISPR/Cas9通过各自独特的机制发挥协同增效作用。