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公开(公告)号：CN102768131B
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201210146739.4
申请日：2012-05-11
Applicant: 北京林业大学
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明提供了一种梅花染色体周年性制片方法，该方法根据时间选取如下分生组织作为制片材料：1)春季，早春枝条新发茎尖；2)初夏，梅花未成熟胚，以及未成熟胚组织培养所得生长点；3)夏、秋，梅花一年生实生苗顶端生长点；4)冬季，梅花休眠枝条水培所得茎尖。以上述的制片材料进行染色体制片，依次进行低温固定、酶解、染色压片，均可获得分散良好、清晰的染色体图像。本发明解决了梅花染色体研究过程中染色体制片取材周期短、时间受限的问题。
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公开(公告)号：CN102768131A
公开(公告)日：2012-11-07
申请号：CN201210146739.4
申请日：2012-05-11
Applicant: 北京林业大学
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明提供了一种梅花染色体周年性制片方法，该方法根据时间选取如下分生组织作为制片材料：1)春季，早春枝条新发茎尖；2)初夏，梅花未成熟胚，以及未成熟胚组织培养所得生长点；3)夏、秋，梅花一年生实生苗顶端生长点；4)冬季，梅花休眠枝条水培所得茎尖。以上述的制片材料进行染色体制片，依次进行低温固定、酶解、染色压片，均可获得分散良好、清晰的染色体图像。本发明解决了梅花染色体研究过程中染色体制片取材周期短、时间受限的问题。
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公开(公告)号：CN103305614A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310223882.3
申请日：2013-06-06
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种紫薇属植物染色体的原位杂交方法，包括制片、制备探针、杂交前预处理、制备杂交液、探针变性与染色体变性、杂交和检测七个步骤。以紫薇属植物中期染色体作为靶DNA，以玉米45S rDNA为探针，将玉米45S rDNA探针清晰的定位在紫薇属植物染色体上。本发明所述的杂交方法能有效消除背景干扰，提高检测灵敏度和准确性，可以较好的应用于紫薇属等小染色体植物的染色体检测，为紫薇属植物染色体的深入研究，提供了新的途径和方法。
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公开(公告)号：CN102787166B
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201210245928.7
申请日：2012-07-16
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种梅花染色体的荧光原位杂交方法，以梅花中期染色体作为靶DNA，以玉米45SrDNA为探针，用缺刻平移法标记探针，将玉米45SrDNA探针清晰的定位在梅花染色体上。本发明在现有技术基础上，对共变性方法进行改进，采用探针变性、染色体和探针共变性两步来完成变性过程，大大提高杂交成功率。本发明确定了合适的变性温度和变性时间，杂交时间和洗脱方法，杂交特异性高，使得FISH技术很好的应用于梅花等小染色体植物的染色体检测，为梅花染色体深入研究，提供了新的途径和方法。
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公开(公告)号：CN102787166A
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201210245928.7
申请日：2012-07-16
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种梅花染色体的荧光原位杂交方法，以梅花中期染色体作为靶DNA，以玉米45SrDNA为探针，用缺刻平移法标记探针，将玉米45SrDNA探针清晰的定位在梅花染色体上。本发明在现有技术基础上，对共变性方法进行改进，采用探针变性、染色体和探针共变性两步来完成变性过程，大大提高杂交成功率。本发明确定了合适的变性温度和变性时间，杂交时间和洗脱方法，杂交特异性高，使得FISH技术很好的应用于梅花等小染色体植物的染色体检测，为梅花染色体深入研究，提供了新的途径和方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103305614B
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201310223882.3
申请日：2013-06-06
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种紫薇属植物染色体的原位杂交方法，包括制片、制备探针、杂交前预处理、制备杂交液、探针变性与染色体变性、杂交和检测七个步骤。以紫薇属植物中期染色体作为靶DNA，以玉米45S rDNA为探针，将玉米45S rDNA探针清晰的定位在紫薇属植物染色体上。本发明所述的杂交方法能有效消除背景干扰，提高检测灵敏度和准确性，可以较好的应用于紫薇属等小染色体植物的染色体检测，为紫薇属植物染色体的深入研究，提供了新的途径和方法。
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公开(公告)号：CN102550404B
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN201110422216.3
申请日：2011-12-16
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明提供一种梅花叶片愈伤组织诱导方法，其为以真梅系梅花品种胚培养获得的实生苗的幼嫩叶片为外植体，近轴面朝上接入愈伤组织诱导培养基，暗培养2周以上，所述的愈伤组织诱导培养基为MS+蔗糖20～40g/L+2，4-D 0.25～2.00mg/L，pH＝5.8～6.0的固体培养基。本发明中建立了梅花叶片愈伤组织高效诱导的培养体系，该体系的建立，能够高效的诱导愈伤组织，使叶片愈伤组织的诱导率可达90％以上，而且愈伤组织的增殖量大。
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公开(公告)号：CN103184277A
公开(公告)日：2013-07-03
申请号：CN201110454348.4
申请日：2011-12-30
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供一种梅花遗传图谱构建方法，其包括如下步骤：1)构建梅花F1代拟测交群体；2)提取父母本及其子代基因组DNA；3)利用限制性内切位点相关的DNA测序方法对父母本及其子代基因组进行重测序，获得符合孟德尔遗传规律的单核苷酸多态性标记；4)根据所获得的单核苷酸多态性标记，应用拟测交策略构建梅花遗传图谱。本发明在克服梅花品种杂交结实率低、育种周期长，构建F1群体困难的基础上，利用RAD的方法和拟测交策略相结合的方法快速构建梅花的遗传图谱程。
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公开(公告)号：CN102564821A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201110406925.2
申请日：2011-12-08
Applicant: 北京林业大学
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明公开了一种梅花生长点染色体制片方法，其为选取梅花一年生枝条顶端生长点或经修剪后新发出的顶端生长点最内侧的长度为0.5～1.0cm的部分，依次进行卡诺固定液固定、前低渗处理、纤维素酶和果胶酶的酶解、后低渗处理，将处理后的顶端生长点进行火焰干燥法制片。本发明采用火焰法制片，省去预处理、解离、染色压片过程，直接固定，提高制片效率，拉长了染色体长度。此外，更重要的是，所得制片能够用于荧光原位杂交实验，同时解决了取材受限于早春的问题。
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公开(公告)号：CN102564821B
公开(公告)日：2014-01-15
申请号：CN201110406925.2
申请日：2011-12-08
Applicant: 北京林业大学
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明公开了一种梅花生长点染色体制片方法，其为选取梅花一年生枝条顶端生长点或经修剪后新发出的顶端生长点最内侧的长度为0.5～1.0cm的部分，依次进行卡诺固定液固定、前低渗处理、纤维素酶和果胶酶的酶解、后低渗处理，将处理后的顶端生长点进行火焰干燥法制片。本发明采用火焰法制片，省去预处理、解离、染色压片过程，直接固定，提高制片效率，拉长了染色体长度。此外，更重要的是，所得制片能够用于荧光原位杂交实验，同时解决了取材受限于早春的问题。
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