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公开(公告)号:CN111254163B
公开(公告)日:2021-12-24
申请号:CN202010078896.0
申请日:2020-02-03
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供一种基因枪介导的日本结缕草高效基因编辑方法,针对日本结缕草中的目标基因ZjSGR设计基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列,将含有编码sgRNA序列的DNA片段连接到携带CRISPR/Cas9的载体中,采用基因枪介导转化法转化日本结缕草,或者,将含有编码sgRNA序列的DNA片段的载体、携带CRISPR/Cas9的载体以及含筛选标记基因的载体,采用基因枪介导转化法共同转化日本结缕草,实现对日本结缕草基因ZjSGR的定点突变,进而获得该基因功能缺失的转基因日本结缕草植株。本发明提供基因枪介导的日本结缕草高效基因编辑方法,作为一种定向编辑日本结缕草基因的工具,编辑效率高达37.5%。
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公开(公告)号:CN105684894B
公开(公告)日:2017-11-14
申请号:CN201410710582.2
申请日:2014-11-27
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种多年生黑麦草愈伤组织的诱导方法,包括以下步骤:将多年生黑麦草种子消毒处理并脱种皮,再在3‑5℃的无菌水中浸泡7‑9小时后接种于诱导培养基中进行愈伤诱导;其中,所述诱导培养基是添加有植物生长调节剂的MS培养基,在所述诱导培养基中含有按质量体积比计3.8‑6.2mg/L的2,4D、0.18‑0.22mg/L的6‑BA和0‑0.12g/L酸水解酪蛋白。利用本发明所提供的方法,可以通过简单的操作步骤对多年生黑麦草愈伤组织进行诱导,不需要对种子进行划开处理,而且具有显著提高的出愈率和胚性愈伤率。
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公开(公告)号:CN102706974A
公开(公告)日:2012-10-03
申请号:CN201210145052.9
申请日:2012-05-10
Applicant: 北京林业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明提供了一种草地早熟禾脂肪酸含量测定方法,包括以下步骤:(1)取草地早熟禾叶片组织于玻璃瓶中;(2)加入含十七烷酸的硫酸;(3)排空玻璃瓶内空气、密封,水浴或金属浴;(4)冷却,加入氯化钠溶液和正己烷,涡旋、离心;(5)取离心后的上层油相,入GC-MS分析,根据样品峰图计算脂肪酸的含量。本发明提供的方法克服了样品间脂类提取效率不一致的问题,优化所需检测样品的植物组织样品量,节省甲酯化过程中的一系列试剂用量;简化了甲酯化的操作步骤,节约了上样之后GC-MS的检测分析时间;克服草地早熟禾甲酯化过程中碳化严重的问题,是一种低成本,快速,简单,高效的草地早熟禾脂肪酸分析方法。
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公开(公告)号:CN111254163A
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN202010078896.0
申请日:2020-02-03
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供一种基因枪介导的日本结缕草高效基因编辑方法,针对日本结缕草中的目标基因ZjSGR设计基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列,将含有编码sgRNA序列的DNA片段连接到携带CRISPR/Cas9的载体中,采用基因枪介导转化法转化日本结缕草,或者,将含有编码sgRNA序列的DNA片段的载体、携带CRISPR/Cas9的载体以及含筛选标记基因的载体,采用基因枪介导转化法共同转化日本结缕草,实现对日本结缕草基因ZjSGR的定点突变,进而获得该基因功能缺失的转基因日本结缕草植株。本发明提供基因枪介导的日本结缕草高效基因编辑方法,作为一种定向编辑日本结缕草基因的工具,编辑效率高达37.5%。
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公开(公告)号:CN105684894A
公开(公告)日:2016-06-22
申请号:CN201410710582.2
申请日:2014-11-27
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种多年生黑麦草愈伤组织的诱导方法,包括以下步骤:将多年生黑麦草种子消毒处理并脱种皮,再在3-5℃的无菌水中浸泡7-9小时后接种于诱导培养基中进行愈伤诱导;其中,所述诱导培养基是添加有植物生长调节剂的MS培养基,在所述诱导培养基中含有按质量体积比计3.8-6.2mg/L的2,4D、0.18-0.22mg/L的6-BA和0-0.12g/L酸水解酪蛋白。利用本发明所提供的方法,可以通过简单的操作步骤对多年生黑麦草愈伤组织进行诱导,不需要对种子进行划开处理,而且具有显著提高的出愈率和胚性愈伤率。
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