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公开(公告)号:CN117106745B
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202310944988.6
申请日:2022-06-01
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种MMLV逆转录突变体,其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计,其中优选的突变组合为E69K、H126Y、N131M、H204R、T306K。与野生型相比,本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。
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公开(公告)号:CN115109844B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202210784337.0
申请日:2022-07-05
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明涉及一种PCR反应体系、反应试剂、试剂盒和方法。该PCR反应体系不含甘油和DMSO,包含:0.7M~1M甜菜碱、10ng/μL~300ng/μL DNA聚合酶、10μM~200μM dNTP、20mM~50mM Tris‑HCl、1mM~4mM Mg2+、70mM~80mM K+、10mM~30mM NH4+、0.1%(v/v)~0.25%(v/v)表面活性剂及0.01%(m/v)~0.1%(m/v)BSA。上述PCR反应体系对水稻叶片的扩增成功率高。
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公开(公告)号:CN117106746B
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202310944992.2
申请日:2022-06-01
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种MMLV逆转录突变体,其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计,其中优选的突变组合为P326K、P401K、H126Y和N131M。与野生型相比,本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。
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公开(公告)号:CN117106746A
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202310944992.2
申请日:2022-06-01
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种MMLV逆转录突变体,其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计,其中优选的突变组合为E69K、D200K、P326K、P401K、T330P和T306K。与野生型相比,本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。
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公开(公告)号:CN115011588B
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202210610398.5
申请日:2022-05-31
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种细菌基因组DNA提取试剂盒和细菌基因组DNA提取方法,所述试剂盒包括悬浮液、结合液、去蛋白液、漂洗液和洗脱液。本发明的试剂盒采用独特的缓冲液系统配合特异性吸附DNA的离心柱,能够快速1h内高效提取各种革兰氏阴性/阳性菌的基因组DNA,并最大限度的去除杂质蛋白及细胞中其他代谢物质。
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公开(公告)号:CN119979498A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202311488942.4
申请日:2023-11-09
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明涉及一种末端脱氧核苷酸转移酶的突变体、生产方法及应用。其相对于如SEQ ID NO.1所示的末端脱氧核苷酸转移酶具有(1)至(8)所示突变中的一个或者多个:(1)第47位谷氨酸(E)突变为苏氨酸(T)、(2)第54位谷氨酸(E)突变为苏氨酸(T)或者丝氨酸(S)、(3)第73位赖氨酸(K)突变为精氨酸(R)、(4)第210位精氨酸(R)突变为亮氨酸(L)、(5)第212位赖氨酸(K)突变为甘氨酸(G)、(6)第268位天冬氨酸(D)突变为丝氨酸(S)、(7)第270位甲硫氨酸(M)突变为苯丙氨酸(F),以及,(8)第273位苯丙氨酸(F)突变为亮氨酸(L)或者酪氨酸(Y)。该突变体相对于对应其野生型能够提高对修饰底物的掺入效率,酶活性得到有效提升。
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公开(公告)号:CN117821422B
公开(公告)日:2024-11-08
申请号:CN202311670481.2
申请日:2023-12-07
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种核酸内切酶IV突变体,其中,所述核酸内切酶IV突变体相比于如SEQ ID NO:1所示的野生型核酸内切酶包含在以下一个或者多个位置处的突变:Y58、K61、K82、E83、K116、E171、R135、D139、K161、N205、E226、R231、E236、K253和I281。本发明提供的核酸内切酶IV突变体在宿主细胞中的可溶表达量相对于野生型核酸内切酶IV得到进一步提高,而其活性并无下降,这使得可以降低批量制备的成本,满足寡核苷酸批量生产的需求。大量的实验表明,相比于野生型核酸内切酶IV,本发明提供的核酸内切酶IV突变体的表达量可提高至少将近1倍,甚至可提高3倍多。
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公开(公告)号:CN117821422A
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202311670481.2
申请日:2023-12-07
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种核酸内切酶IV突变体,其中,所述核酸内切酶IV突变体相比于如SEQ ID NO:1所示的野生型核酸内切酶包含在以下一个或者多个位置处的突变:Y58、K61、K82、E83、K116、E171、R135、D139、K161、N205、E226、R231、E236、K253和I281。本发明提供的核酸内切酶IV突变体在宿主细胞中的可溶表达量相对于野生型核酸内切酶IV得到进一步提高,而其活性并无下降,这使得可以降低批量制备的成本,满足寡核苷酸批量生产的需求。大量的实验表明,相比于野生型核酸内切酶IV,本发明提供的核酸内切酶IV突变体的表达量可提高至少将近1倍,甚至可提高3倍多。
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公开(公告)号:CN120060189A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202311620316.6
申请日:2023-11-30
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本申请属于基因工程和酶工程技术领域,具体涉及一种末端脱氧核苷酸转移酶突变体及其应用。本申请通过对野生型鸟类TdT结构进行分析,对影响该酶活性的氨基酸位点第47位谷氨酸(E)、第54位谷氨酸(E)、第158位赖氨酸(K)、第210位精氨酸(R)、第212位赖氨酸(K)、第213位天冬酰胺(N)、第214位异亮氨酸(I)、第273位苯丙氨酸(F)、第332位精氨酸(R)进行特定的设计,通过本申请设计得到的末端脱氧核苷酸转移酶突变体能够有效提升酶的活性。
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