公开(公告)号：CN118667797A

公开(公告)日：2024-09-20

申请号：CN202310267686.X

申请日：2023-03-14

申请人： 北京据德医药科技有限公司

发明人： 朱笑婷 ,  夏文娟 ,  姜慧 ,  张天赋 ,  张安平 ,  李建 ,  饶易坤 ,  耿偲偲 ,  马鑫 ,  姜飞飞 ,  张建军 ,  张维

IPC分类号： C12N9/26 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  A61K48/00 ,  A61K38/47 ,  A61P3/08

摘要： 本发明公开了一种重组酸性α‑葡萄糖苷酶及其用途。基于亲本Myozyme的氨基酸序列，通过使用人工信号肽、去除前体肽序列，获得ASP‑GAA‑3，将ASP‑GAA‑3的核酸序列插入到pEE17.4载体中，并通过电击转化构建成CHO稳定细胞株，对稳定细胞株单克隆进行表达和纯化得到高纯度的rhGAA。这种方式不仅可以提高rhGAA的表达量，表达后加工过程不用再剪切掉前体肽，可以直接获得和商品化的Myozyme相同的N端序列。使用ASP信号肽以及去除前体肽序列构建稳定细胞株表达出的蛋白，具有和NSP信号肽表达的Myozyme有相似的酶活。

公开(公告)号：CN115109790A

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202110306525.8

申请日：2021-03-23

申请人： 北京据德医药科技有限公司

发明人： 王冀姝 ,  夏文娟 ,  李玲玲 ,  魏婷婷 ,  饶易坤 ,  彭璐佳 ,  任亚芳 ,  郭建云 ,  张维

IPC分类号： C12N15/62 ,  C12N9/24 ,  C07K19/00 ,  C12N15/85

摘要： 本发明公开了分离的核苷酸序列，包括信号肽序列和编码a‑L‑艾杜糖醛酸普酶核苷酸序列，其中，信号肽序列不是a‑L‑艾杜糖醛酸普酶的天然信号肽序列。通过使用人工信号肽替换天然信号肽，能提高a‑L‑艾杜糖醛酸普酶的表达量，还能产生切点单一，且翻译后修饰(N‑糖基化磷酸化)正确的蛋白，能跨越细胞膜，在细胞内发挥酶活性。