公开(公告)号：CN1262653C

公开(公告)日：2006-07-05

申请号：CN03157031.3

申请日：2003-09-11

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 张凤兰 ,  张德双 ,  徐家炳 ,  刘秀村 ,  王美 ,  余阳俊 ,  赵岫云

IPC: C12N15/29 ,  C12P19/34 ,  C12Q1/68 ,  C07H21/04

Abstract: 本发明公开了一种与大白菜桔红心性状紧密连锁的特征序列扩增标记，其DNA序列见序列表中SEQ ID NO：1序列。其获得方法包括：1)提取基因组DNA，使用RAPD随机引物对基因组DNA进行PCR反应，对PCR产物进行电泳分析；通过BSA法，寻找与桔红心性状连锁的RAPD标记，测定连锁距离并验证连锁关系。2)对与桔红心性状连锁的RAPD产物进行回收、克隆和测序，根据测序结果的两端序列设计引物对，长度20个碱基，用SCAR引物进行PCR扩增反应，对反应产物进行电泳分析，测定连锁距离并验证连锁关系。本发明的优点是：获得的SCAR标记具有分析程序简单、周期短、所需DNA量极少(一般为5-25ng)且质量要求不苛刻；设备简单；与其他标记类型相比，成本低，重复性好，标记稳定可靠，便于统计。

公开(公告)号：CN1594588A

公开(公告)日：2005-03-16

申请号：CN03157031.3

申请日：2003-09-11

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 张凤兰 ,  张德双 ,  徐家炳 ,  刘秀村 ,  王美 ,  余阳俊 ,  赵岫云

IPC: C12P19/34 ,  C12N15/29 ,  C12Q1/68 ,  C07H21/04

Abstract: 本发明公开了一种与大白菜桔红心性状紧密连锁的特征序列扩增标记，其DNA序列见序列表中SEQ ID NO：1序列。其获得方法包括：1)提取基因组DNA，使用RAPD随机引物对基因组DNA进行PCR反应，对PCR产物进行电泳分析；通过BSA法，寻找与桔红心性状连锁的RAPD标记，测定连锁距离并验证连锁关系。2)对与桔红心性状连锁的RAPD产物进行回收、克隆和测序，根据测序结果的两端序列设计引物对，长度20个碱基，用SCAR引物进行PCR扩增反应，对反应产物进行电泳分析，测定连锁距离并验证连锁关系。本发明的优点是：获得的SCAR标记具有分析程序简单、周期短、所需DNA量极少(一般为5－25ng)且质量要求不苛刻；设备简单；与其他标记类型相比，成本低，重复性好，标记稳定可靠，便于统计。