公开(公告)号：CN118440924A

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202410645063.6

申请日：2024-05-23

Applicant: 北京工商大学

Inventor： 马爱进 ,  陈伟 ,  贾英民

IPC: C12N9/80 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/18 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组糖肽酶及其应用。涉及酶工程技术领域。提供了重组糖肽酶PNGF1及其密码子优化的编码基因、氨基酸序列，以及其表达和应用。本发明的重组糖肽酶在天然蛋白去除信号肽后，在N端融合HIS标签、TEVsite和谷胱甘肽重构N端，根据大肠杆菌密码子的偏好性优化重组糖肽酶基因，采用全基因合成并构建重组表达载体30a‑PNGF1，实现活性重组糖肽酶PNGF1高效大量的可溶性表达，从1L培养物中纯化出重组糖肽酶约59.49mg(约1.75×107U)。活性重组糖肽酶PNGF1具有较高的活性，酶活力约295000U/mg。重组糖肽酶PNGF1对天然糖蛋白具有高效的去糖基作用。

公开(公告)号：CN118240727A

公开(公告)日：2024-06-25

申请号：CN202410135354.0

申请日：2024-01-31

Applicant: 北京工商大学

Inventor： 陈伟 ,  王成涛 ,  周思静 ,  张海静

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12N15/52 ,  C12N15/53 ,  C12P7/22 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种重组谷氨酸棒杆菌、其构建方法及其在全细胞转化生产羟基酪醇中的应用，属于生物工程与生物技术领域，所述重组谷氨酸棒杆菌为通过大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌之间的穿梭质粒pEC‑XK99E同时表达对羟基苯乙醛合酶PcAAS、苯乙醛还原酶PAR和FAD依赖性单加氧酶HpaBC，将所述重组谷氨酸棒杆菌用于全细胞转化生产羟基酪醇，实现了对底物酪氨酸的高效转化，摩尔转化率达到98%，羟基酪醇产量为31.2 g/L，并且生产周期大大缩短，本发明具有生产效率高、操作简单等优点。