公开(公告)号：CN102329874B

公开(公告)日：2013-11-06

申请号：CN201110305190.4

申请日：2011-10-10

Applicant: 北京工业大学

Inventor： 曾薇 ,  李磊 ,  王向东 ,  李博晓 ,  彭永臻

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及活性污泥中氨氧化菌实时荧光定量PCR检测方法，属于污水生物处理技术领域，用于对污水处理厂活性污泥中的氨氧化菌的定量检测。目前，研究者多是采用等梯度稀释含有目标DNA片段的质粒制备标准品，进而建立定量标准曲线，但操作较为繁琐且成本较高。本发明采用基因组PCR扩增片段切胶纯化回收产物法建立检测氨氧化菌的实时荧光定量PCR标准曲线，初始模板数的对数与荧光域值的循环数Ct值之间呈现较好的线性关系，相关系数为0.999。利用建立的标准曲线对活性污泥中氨氧化菌进行定量检测。本发明为污水生物脱氮系统中主要功能微生物氨氧化菌的定量检测提供了一种经济、简便、可靠的分析方法。

公开(公告)号：CN103146814A

公开(公告)日：2013-06-12

申请号：CN201310042881.9

申请日：2013-02-03

Applicant: 北京工业大学

Inventor： 曾薇 ,  李博晓 ,  张立东 ,  王向东 ,  彭永臻

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 一种污水处理厂聚磷菌实时荧光定量PCR检测方法，属于污水生物处理技术领域。本发明以实际生活污水富集的聚磷菌作为标准品来源，菌群进化分支丰富。采用针对聚磷菌的关键功能基因——聚合磷酸盐激酶基因的特异性引物，获得了Ⅰ、ⅡA、ⅡB、ⅡC和ⅡD5个主要进化分支的标准品，并采用通用性好、成本较低的SYBR Green荧光染料法建立了5个主要进化分支的实时荧光定量PCR标准曲线。5条标准曲线的相关系数分别为1.000，0.998，0.999，0.999，0.998。扩增效率在90%到110%之间。利用建立的标准曲线对某污水处理系统中聚磷菌的不同进化分支进行定量检测。本发明经济、简便、可靠。

公开(公告)号：CN103146814B

公开(公告)日：2014-10-15

申请号：CN201310042881.9

申请日：2013-02-03

Applicant: 北京工业大学

Inventor： 曾薇 ,  李博晓 ,  张立东 ,  王向东 ,  彭永臻

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 一种污水处理厂聚磷菌实时荧光定量PCR检测方法，属于污水生物处理技术领域。本发明以实际生活污水富集的聚磷菌作为标准品来源，菌群进化分支丰富。采用针对聚磷菌的关键功能基因——聚合磷酸盐激酶基因的特异性引物，获得了Ⅰ、ⅡA、ⅡB、ⅡC和ⅡD5个主要进化分支的标准品，并采用通用性好、成本较低的SYBR Green荧光染料法建立了5个主要进化分支的实时荧光定量PCR标准曲线。5条标准曲线的相关系数分别为1.000，0.998，0.999，0.999，0.998。扩增效率在90%到110%之间。利用建立的标准曲线对某污水处理系统中聚磷菌的不同进化分支进行定量检测。本发明经济、简便、可靠。

公开(公告)号：CN102329874A

公开(公告)日：2012-01-25

申请号：CN201110305190.4

申请日：2011-10-10

Applicant: 北京工业大学

Inventor： 曾薇 ,  李磊 ,  王向东 ,  李博晓 ,  彭永臻

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及活性污泥中氨氧化菌实时荧光定量PCR检测方法，属于污水生物处理技术领域，用于对污水处理厂活性污泥中的氨氧化菌的定量检测。目前，研究者多是采用等梯度稀释含有目标DNA片段的质粒制备标准品，进而建立定量标准曲线，但操作较为繁琐且成本较高。本发明采用基因组PCR扩增片段切胶纯化回收产物法建立检测氨氧化菌的实时荧光定量PCR标准曲线，初始模板数的对数与荧光域值的循环数Ct值之间呈现较好的线性关系，相关系数为0.999。利用建立的标准曲线对活性污泥中氨氧化菌进行定量检测。本发明为污水生物脱氮系统中主要功能微生物氨氧化菌的定量检测提供了一种经济、简便、可靠的分析方法。