一种高灵敏融合细胞筛选方法

    公开(公告)号:CN108642086B

    公开(公告)日:2022-06-07

    申请号:CN201810457164.5

    申请日:2018-05-14

    Abstract: 一种高灵敏融合细胞筛选方法属于基因工程领域,具体涉及一种基于Cre重组酶与Loxp序列特异识别实现融合细胞快速筛选的方案,涉及一种通过Cre重组酶与Loxp序列的切割,实现融合细胞的荧光切换与细胞抗性切换,从而实现融合细胞的单细胞筛选与后续扩大培养。同时,通过利用泛表达Cre蛋白裸鼠,将改造的肿瘤细胞注入体内,可观察细胞融合作用导致的肿瘤细胞转移与发展。本发明提供了一套慢病毒质粒载体,其能够实现融合细胞高灵敏度快速筛选与体内肿瘤转移的荧光成像分析载体A其核苷酸序列如Seq ID No.1所示;载体B其:核苷酸序列如Seq ID No.2所示。

    一种哺乳动物启动子活性评价质粒载体及应用

    公开(公告)号:CN112029797B

    公开(公告)日:2022-06-07

    申请号:CN202010571011.0

    申请日:2020-06-22

    Inventor: 刘馨慧 黄华 李欢

    Abstract: 一种哺乳动物启动子活性评价质粒载体及应用属于基因工程领域,具体涉及一种基于目的蛋白连接Cre重组酶与Lox2272‑Loxp序列特异识别实现评价目的蛋白与基因启动子相互作用的方案。通过Cre重组酶与Lox2272‑Loxp序列的特异性识别,实现启动子先反转,后启动,从而实现下游的萤火虫荧光素酶延迟转录。该方案的优势可极大降低荧光素酶背景,使荧光素酶滞后于目的蛋白表达,更灵敏反应目的蛋白对靶基因启动子的调控作用。本发明提供了一套瞬时转染质粒载体,其能够实现蛋白与启动子互相作用高灵敏分析。载体A其核苷酸序列如Seq ID No.1所示;载体B其:核苷酸序列如Seq ID No.2所示。

    一种高灵敏融合细胞筛选方法

    公开(公告)号:CN108642086A

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201810457164.5

    申请日:2018-05-14

    Abstract: 一种高灵敏融合细胞筛选方法属于基因工程领域,具体涉及一种基于Cre重组酶与Loxp序列特异识别实现融合细胞快速筛选的方案,涉及一种通过Cre重组酶与Loxp序列的切割,实现融合细胞的荧光切换与细胞抗性切换,从而实现融合细胞的单细胞筛选与后续扩大培养。同时,通过利用泛表达Cre蛋白裸鼠,将改造的肿瘤细胞注入体内,可观察细胞融合作用导致的肿瘤细胞转移与发展。本发明提供了一套慢病毒质粒载体,其能够实现融合细胞高灵敏度快速筛选与体内肿瘤转移的荧光成像分析载体A其核苷酸序列如Seq ID No.1所示;载体B其:核苷酸序列如Seq ID No.2所示。

    一种哺乳动物启动子活性评价质粒载体及应用

    公开(公告)号:CN112029797A

    公开(公告)日:2020-12-04

    申请号:CN202010571011.0

    申请日:2020-06-22

    Inventor: 刘馨慧 黄华 李欢

    Abstract: 一种哺乳动物启动子活性评价质粒载体及应用属于基因工程领域,具体涉及一种基于目的蛋白连接Cre重组酶与Lox2272-Loxp序列特异识别实现评价目的蛋白与基因启动子相互作用的方案。通过Cre重组酶与Lox2272-Loxp序列的特异性识别,实现启动子先反转,后启动,从而实现下游的萤火虫荧光素酶延迟转录。该方案的优势可极大降低荧光素酶背景,使荧光素酶滞后于目的蛋白表达,更灵敏反应目的蛋白对靶基因启动子的调控作用。本发明提供了一套瞬时转染质粒载体,其能够实现蛋白与启动子互相作用高灵敏分析。载体A其核苷酸序列如Seq ID No.1所示;载体B其:核苷酸序列如Seq ID No.2所示。

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