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公开(公告)号：CN1059703C
公开(公告)日：2000-12-20
申请号：CN93103997.5
申请日：1993-04-10
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明是一种人胰岛素的基因工程生产方法。本法采用了大肠杆菌表达体系，实现了编码人胰岛素前体基因的直接表达，排除了传统采用的融合方式表达，给后加工带来了极大的方便。本法的表达率在20-30%，经细胞破碎分离包含体，包含体溶解，二硫键还原及重组，只经一根分子筛柱就可得纯度大于90%的人胰岛素前体。此产物可直接用胰酶转肽转为人胰岛素，产品的化学结构、生物活性，与人胰岛素相同。
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公开(公告)号：CN1075983A
公开(公告)日：1993-09-08
申请号：CN93103997.5
申请日：1993-04-10
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明是一种人胰岛素的基因工程生产方法。本法采用了大肠杆菌表达体系，实现了编码人胰岛素前体基因的直接表达，排除了传统采用的融合方式表达，给后加工带来了极大的方便。本法的表达率在20—30％，经细胞破碎分离包含体，包含体溶解，二硫键还原及重组，只经一根分子筛柱就可得纯度大于90％的人胰岛素前体。此产物可直接用胰酶转肽转为人胰岛素，产品的化学结构、生物活性，与人胰岛素相同。
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公开(公告)号：CN1050862C
公开(公告)日：2000-03-29
申请号：CN93102115.4
申请日：1993-03-04
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明通过基因工程技术，构建了新型高效表达的昆虫核多粒包埋型多角病毒转移载体。该质粒多角体蛋白启动子基因结构完整，3′-端同源序列区小于普通转移载体质粒，人尿激酶原基因被插入到该质粒中，得到了高效表达。通过在培养的昆虫细胞中进行同源重组得到含人尿激酶原基因的重组昆虫核多粒包埋型多角体病毒。由此感染的昆虫细胞高活形高效表达人尿激酶原并直接分泌到培养基上清中。单克隆抗体亲和层析一步法回收与纯化表达的人尿激酶原蛋白质。
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公开(公告)号：CN1075165A
公开(公告)日：1993-08-11
申请号：CN93102115.4
申请日：1993-03-04
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明通过基因工程技术，构建了新型高效表达的昆虫核多粒包埋型多角病毒转移载体。该质粒多角体蛋白启动子基因结构完整，3′-端同源序列区小于普通转移载体质粒，人尿激酶原基因被插入到该质粒中，得到了高效表达。通过在培养的昆虫细胞中进行同源重组得到含人尿激酶原基因的重组昆虫核多粒包埋型多角体病毒。由此感染的昆虫细胞高活性高效表达人尿激酶原并直接分泌到培养基上清中。单克隆抗体亲和层析一步法回收与纯化表达的人尿激酶原蛋白质。
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