公开(公告)号：CN1207386C

公开(公告)日：2005-06-22

申请号：CN01136642.7

申请日：2001-10-24

Applicant: 北京大学

Inventor： 白素兰 ,  白书农

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种克隆基因的方法及其应用。目的是提供一种能够高效、准确地提取生物体特殊部位基因的方法。本发明技术方案是以被固定在石蜡切片中的生物材料中的mRNA为模版，在载玻片上进行原位反转录，然后利用PCR技术扩增反转录产物，克隆基因。为了达到理想的效果，对所利用的石蜡切片应进行前处理，包括脱蜡、用蛋白酶处理和基因组DNA的酶解。为了使提取的效果更好，原位反转录后，PCR扩增前，在切片上对反转录产物进行加尾反应。本发明的方法在构建cDNA文库中将得到广泛的应用。

公开(公告)号：CN1414106A

公开(公告)日：2003-04-30

申请号：CN01136642.7

申请日：2001-10-24

Applicant: 北京大学

Inventor： 白素兰 ,  白书农

IPC: C12P19/34

Abstract: 本发明的名称为一种克隆基因的方法及其应用。本发明的目的是提供一种能够高效、准确地提取生物体特殊部位基因的方法。本发明技术方案是：一种克隆基因的方法，是自被固定在石蜡切片中的生物材料中分离基因，克隆基因。具体地说，该方法是以被固定在石蜡切片材料中的mRNA为模版，在载玻片上进行原位反转录，然后利用PCR技术扩增反转录产物，克隆基因。为了达到理想的效果，对所利用的石蜡切片应进行前处理，包括脱蜡、用蛋白酶处理和基因组DNA的酶解。为了使提取的效果更好，原位反转录后，PCR扩增前，在切片上对反转录产物进行加尾反应。本发明的方法在构建cDNA文库中将得到广泛的应用。