公开(公告)号：CN118956785A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202410968134.6

申请日：2024-07-18

申请人： 北京化工大学

发明人： 孙新晓 ,  袁其朋 ,  谢冲 ,  申晓林 ,  王佳

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/06 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶表面突变体及其应用。所述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶表面突变体是由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列发生氨基酸突变得到的，包括以下至少一种氨基酸突变：D102E、E163K、E190K、L196F、K199N。本发明还提供了一种利用上述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶突变体构建的合成香豆素类化合物的工程菌。所述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶突变体具有较好的酶活性及稳定性，其酶活性提高了1.7倍以上，甚至可以提高至8.4倍；所以，上述工程菌能够实现东莨菪素、秦皮素、秦皮苷、东莨菪苷、秦皮乙素、秦皮甲素或菊苣苷等香豆素类化合物的高效生物合成，为香豆素类化合物的微生物合成提供了参考。

公开(公告)号：CN118956787A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202410968136.5

申请日：2024-07-18

申请人： 北京化工大学

发明人： 袁其朋 ,  孙新晓 ,  谢冲 ,  申晓林 ,  王佳

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/06 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶表面突变体及其应用。所述对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶表面突变体是由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列发生氨基酸突变得到的，包括以下至少一种氨基酸突变：A159K、E186K。本发明还提供了一种利用上述对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶突变体构建的合成香豆素类化合物的工程菌，其中，所述香豆素类化合物可以为伞形酮或瑞香素。所述对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶突变体具有较好的酶活性及稳定性，其中，所述对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶突变体的酶活性提高了3.1倍以上，甚至可以提高5.6倍；如此，上述工程菌不但能够实现高效合成伞形酮或瑞香素等香豆素类化合物，而且还能够实现伞形酮或瑞香素等化合物的高效从头生物合成。

公开(公告)号：CN118956786A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202410968135.0

申请日：2024-07-18

申请人： 北京化工大学

发明人： 孙新晓 ,  袁其朋 ,  谢冲 ,  申晓林 ,  王佳

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/06 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶口袋突变体及应用。所述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶口袋突变体是由SEQ ID NO .1所示的氨基酸序列发生氨基酸突变得到的，包括以下至少一种氨基酸突变：L141N、L141G、A142N、Q144D、F156Y、V157T、N311G。本发明还提供了一种利用上述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶突变体构建的合成香豆素类化合物的工程菌。所述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶突变体具有较好的酶活性及稳定性，如此，上述工程菌不但能够实现高效合成东莨菪素、秦皮素、秦皮苷和东莨菪苷等香豆素类化合物，而且还能够实现东莨菪素、秦皮素、秦皮苷和东莨菪苷等化合物的高效从头生物合成，为香豆素类化合物的微生物合成提供了参考。