公开(公告)号：CN109868279A

公开(公告)日：2019-06-11

申请号：CN201711260109.9

申请日：2017-12-04

Applicant: 北京农学院

Inventor： 杨明峰 ,  何炫程 ,  马兰青 ,  吕鹤书 ,  刘灿 ,  马伯宁 ,  项晨 ,  韦航涛

IPC: C12N15/65 ,  C12N15/63 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了检测待测mRNA是否含有miRNA靶位点的方法及其应用。该方法包括：1)提供目的miRNA表达载体和待测mRNA表达载体；待测mRNA表达载体能在生物细胞中转录出名称为起始密码子区-待测mRNA-kozak-报告基因mRNA的mRNA分子，该mRNA分子由起始密码子区、位于起始密码子区下游的待测mRNA-kozak的区段和位于待测mRNA-kozak下游的报告基因mRNA连接而成；2)构建导入目的miRNA表达载体和待测mRNA表达载体的重组生物细胞；3)检测重组生物细胞中的所述报告基因的表达情况，确定待测mRNA是否含有目的miRNA的靶位点。本发明可用于筛选miRNA靶基因。

公开(公告)号：CN109868279B

公开(公告)日：2021-08-24

申请号：CN201711260109.9

申请日：2017-12-04

Applicant: 北京农学院

Inventor： 杨明峰 ,  何炫程 ,  马兰青 ,  吕鹤书 ,  刘灿 ,  马伯宁 ,  项晨 ,  韦航涛

IPC: C12N15/65 ,  C12N15/63 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了检测待测mRNA是否含有miRNA靶位点的方法及其应用。该方法包括：1)提供目的miRNA表达载体和待测mRNA表达载体；待测mRNA表达载体能在生物细胞中转录出名称为起始密码子区‑待测mRNA‑kozak‑报告基因mRNA的mRNA分子，该mRNA分子由起始密码子区、位于起始密码子区下游的待测mRNA‑kozak的区段和位于待测mRNA‑kozak下游的报告基因mRNA连接而成；2)构建导入目的miRNA表达载体和待测mRNA表达载体的重组生物细胞；3)检测重组生物细胞中的所述报告基因的表达情况，确定待测mRNA是否含有目的miRNA的靶位点。本发明可用于筛选miRNA靶基因。