公开(公告)号：CN111560339B

公开(公告)日：2024-03-15

申请号：CN202010221514.5

申请日：2020-03-26

Applicant: 云南省林业和草原科学院

Inventor： 袁瑞玲 ,  陈鹏 ,  郑传伟 ,  王艺璇 ,  冯丹 ,  杜春花

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  A01N63/20 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，具体涉及一种桔小实蝇dsRNA细菌表达菌液的制备及其使用方法，选取桔小实蝇Flightin基因的部分序列SEQ ID NO.1，通过引物设计、flightin基因及对照egfp基因片段的克隆、构建桔小实蝇RNAi干扰表达载体、重组质粒转化大肠杆菌HT115以及dsRNA在大肠杆菌HT115中的表达，获得桔小实蝇dsRNA细菌表达菌液。本发明采用重组质粒可以在大肠杆菌HT115中表达大量所需的外源目的dsRNA的方法，降低了实验成本，持续饲喂菌液后对桔小实蝇的飞行能力有抑制作用，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN111560339A

公开(公告)日：2020-08-21

申请号：CN202010221514.5

申请日：2020-03-26

Applicant: 云南省林业和草原科学院

Inventor： 袁瑞玲 ,  陈鹏 ,  郑传伟 ,  王艺璇 ,  冯丹 ,  杜春花

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  A01N63/20 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，具体涉及一种桔小实蝇dsRNA细菌表达菌液的制备及其使用方法，选取桔小实蝇Flightin基因的部分序列SEQ ID NO.1，通过引物设计、flightin基因及对照egfp基因片段的克隆、构建桔小实蝇RNAi干扰表达载体、重组质粒转化大肠杆菌HT115以及dsRNA在大肠杆菌HT115中的表达，获得桔小实蝇dsRNA细菌表达菌液。本发明采用重组质粒可以在大肠杆菌HT115中表达大量所需的外源目的dsRNA的方法，降低了实验成本，持续饲喂菌液后对桔小实蝇的飞行能力有抑制作用，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN111334510A

公开(公告)日：2020-06-26

申请号：CN202010221530.4

申请日：2020-03-26

Applicant: 云南省林业和草原科学院

Inventor： 袁瑞玲 ,  陈鹏 ,  郑传伟 ,  王艺璇 ,  冯丹 ,  杜春花

IPC: C12N15/113 ,  A01N57/16 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，具体涉及一种用于干扰桔小实蝇Flightin基因的RNAi干扰片段制备及其使用方法，制备方法为，选取桔小实蝇Flightin基因部分序列，设计干扰引物，进行模板DNA的扩增，以扩增产物为模板合成dsRNA，纯化得到浓度和纯度俱佳的RNAi干扰产物，选用物质的量的浓度为1000ng/μl的RNAi干扰产物，分别在桔小实蝇蛹后期或刚羽化两个时期，通过显微注射完成摄入，本发明实施的技术方案干扰桔小实蝇Flightin基因的效果显著，为安全、高效的生物防治提供了新的防治方法。

公开(公告)号：CN111334510B

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202010221530.4

申请日：2020-03-26

Applicant: 云南省林业和草原科学院

Inventor： 袁瑞玲 ,  陈鹏 ,  郑传伟 ,  王艺璇 ,  冯丹 ,  杜春花

IPC: C12N15/113 ,  A01N57/16 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，具体涉及一种用于干扰桔小实蝇Flightin基因的RNAi干扰片段制备及其使用方法，制备方法为，选取桔小实蝇Flightin基因部分序列，设计干扰引物，进行模板DNA的扩增，以扩增产物为模板合成dsRNA，纯化得到浓度和纯度俱佳的RNAi干扰产物，选用物质的量的浓度为1000ng/μl的RNAi干扰产物，分别在桔小实蝇蛹后期或刚羽化两个时期，通过显微注射完成摄入，本发明实施的技术方案干扰桔小实蝇Flightin基因的效果显著，为安全、高效的生物防治提供了新的防治方法。