公开(公告)号：CN105838733A

公开(公告)日：2016-08-10

申请号：CN201610333623.X

申请日：2016-05-18

申请人： 云南省农业科学院花卉研究所

发明人： 周旭红 ,  朱健康 ,  苏艳 ,  王继华 ,  李姝影 ,  田敏 ,  赵丹丹

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N15/84 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00

CPC分类号： C12N15/8205 ,  C12N15/66 ,  C12N15/8218 ,  C12N2800/80

摘要： 本发明涉及Cas9介导的香石竹基因编辑载体和应用，首先，构建含香石竹目标基因靶位点的CRISPR?Cas9系统，将Cas9表达载体导入根癌农杆菌C58菌株，再将香石竹叶片的基部放入预培养培养基，22±2℃光照培养3?4天，将含Cas 9表达载体的农杆菌活化，再将预培养后的外植体浸入已活化备好的农杆菌菌液中20?30分钟，吸干菌液，接着转入共培养基中，22±2℃暗培养3?4天，再转置到筛选培养基培养，22±2℃光照培养，分化出再生芽，将再生芽转入增殖培养基中进行增殖筛选培养，并检测阳性转基因再生植株，对靶位点进行测序，检测香石竹目标基因靶点的突变株系。