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公开(公告)号：CN104007092B
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201410211308.0
申请日：2014-05-19
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
IPC分类号： G01N21/64
摘要： 本发明提供一种基于点击化学的铜离子荧光检测方法，属于化学分析检测领域。该方法先将修饰了叠氮基团的短的单链核酸、修饰了炔基基团的短的单链核酸和作为连接模板的核酸分别溶解在Tris-HCl缓冲溶液中配制成核酸溶液；然后形成混合溶液，向混合溶液中加入抗坏血酸、水和Tris-HCl缓冲溶液，形成检测体系；再向检测体系中加入待测样品，对检测体系的强度进行荧光检测；以已知铜离子浓度为横坐标，相对的荧光强度值为纵坐标，计算得出对应的待测样品中铜离子的浓度。本发明利用基于点击化学的核酸连接反应，简单快速、稳定性好、灵敏度高，在0～40nM范围内有很好的线性响应，检测限低至0.023nM。
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公开(公告)号：CN103063657B
公开(公告)日：2016-01-13
申请号：CN201210567032.0
申请日：2012-12-24
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
IPC分类号： G01N21/76
摘要： 基于化学发光法检测蛋白酶活性及其抑制剂活性的方法，涉及生物分析化学技术领域，解决了现有检测酶活性的方法存在的流路设计复杂、操作繁琐、检测灵敏度低和成本高的问题。基于化学发光法检测蛋白酶活性的方法为：步骤一、将血红素蛋白溶解于Tris-HCl缓冲溶液中，得到血红素蛋白溶液；步骤二、向步骤一中的血红素蛋白溶液中加入不同浓度的蛋白酶，形成反应体系；步骤三、将步骤二中的反应体系注入到流动注射化学发光流路中，与鲁米诺-过氧化氢检测体系发生化学发光反应，对蛋白酶活性进行检测。本发明的方法具有简便、快捷、高灵敏、低成本的优点，能够得到更低的检出限，对胰蛋白酶检出限可以达到1ng/mL。
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公开(公告)号：CN104007092A
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201410211308.0
申请日：2014-05-19
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
IPC分类号： G01N21/64
摘要： 本发明提供一种基于点击化学的铜离子荧光检测方法，属于化学分析检测领域。该方法先将修饰了叠氮基团的短的单链核酸、修饰了炔基基团的短的单链核酸和作为连接模板的核酸分别溶解在Tris-HCl缓冲溶液中配制成核酸溶液；然后形成混合溶液，向混合溶液中加入抗坏血酸、水和Tris-HCl缓冲溶液，形成检测体系；再向检测体系中加入待测样品，对检测体系的强度进行荧光检测；以已知铜离子浓度为横坐标，相对的荧光强度值为纵坐标，计算得出对应的待测样品中铜离子的浓度。本发明利用基于点击化学的核酸连接反应，简单快速、稳定性好、灵敏度高，在0～40nM范围内有很好的线性响应，检测限低至0.023nM。
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公开(公告)号：CN103992788A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410201064.8
申请日：2014-05-13
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
IPC分类号： C09K11/06 , C07C219/14 , C07C213/02 , G01N21/64
摘要： 本发明提供一种六苯并苯衍生物探针、制备方法及基于六苯并苯衍生物探针与核酸适配体的蛋白质检测方法。解决现有蛋白检测方法操作繁琐，过程复杂，灵敏度低的问题。该探针为1，2，7，8-四-(4-三甲基胺丁基氧-羰基)-六苯并苯，带四个电荷，具有水溶性。本发明还提供一种六苯并苯衍生物探针的制备方法。本发明还提供一种基于六苯并苯衍生物探针与核酸适配体的蛋白质检测方法，本发明检测蛋白质的方法是免标记的，不需要共价修饰，简单快捷，同时检测给出的是荧光增强的信号，比起荧光减弱的信号，灵敏度更高。
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公开(公告)号：CN102260739B
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201110182062.5
申请日：2011-06-30
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种端粒酶活性的检测方法。该检测方法从待测样品中获得具有活性的端粒酶后，延伸TS引物得到端粒酶延伸产物，将端粒酶延伸产物作为模板，在四个引物的存在下，进行缺刻连接酶链式反应扩增，得到扩增产物，将该扩增产物与分子信标混合反应后，荧光检测得到端粒酶活性。该检测方法灵敏度高、特异性好，能够有效检测待测样品中的端粒酶活性。
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公开(公告)号：CN102260739A
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN201110182062.5
申请日：2011-06-30
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种端粒酶活性的检测方法。该检测方法从待测样品中获得具有活性的端粒酶后，延伸TS引物得到端粒酶延伸产物，将端粒酶延伸产物作为模板，在四个引物的存在下，进行缺刻连接酶链式反应扩增，得到扩增产物，将该扩增产物与分子信标混合反应后，荧光检测得到端粒酶活性。该检测方法灵敏度高、特异性好，能够有效检测待测样品中的端粒酶活性。
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公开(公告)号：CN104634775B
公开(公告)日：2017-08-25
申请号：CN201510063506.1
申请日：2015-02-06
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
IPC分类号： G01N21/76 , C07D487/22
摘要： 本发明涉及一种基于核酸适配体和锰卟啉催化的化学发光检测蛋白质的方法，解决现有技术中基于核酸适配体的蛋白质检测的方法存在着灵敏度低，稳定性差，步骤繁琐，成本高等缺点的技术问题。方法，包括以下步骤：(1)制备锰卟啉探针；(2)蛋白质检测向化学反应器中加入20mM Tris‑HCl，25μM鲁米诺和0.05％Triton X‑100，再加入锰卟啉探针，最后加入包含核酸适配体和待测蛋白质的溶液；将所述化学反应器放入化学发光检测器中，最后用微量进样器加入浓度为100mM的H2O2，记录化学发光随时间的变化。该方法是基于核酸适配体诱导的锰卟啉集聚建立的快速、灵敏、特异、简便的蛋白质的检测方法。
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公开(公告)号：CN103992788B
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201410201064.8
申请日：2014-05-13
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
IPC分类号： C09K11/06 , C07C219/14 , C07C213/02 , G01N21/64
摘要： 本发明提供一种六苯并苯衍生物探针、制备方法及基于六苯并苯衍生物探针与核酸适配体的蛋白质检测方法。解决现有蛋白检测方法操作繁琐，过程复杂，灵敏度低的问题。该探针为1，2，7，8-四-(4-三甲基胺丁基氧-羰基)-六苯并苯，带四个电荷，具有水溶性。本发明还提供一种六苯并苯衍生物探针的制备方法。本发明还提供一种基于六苯并苯衍生物探针与核酸适配体的蛋白质检测方法，本发明检测蛋白质的方法是免标记的，不需要共价修饰，简单快捷，同时检测给出的是荧光增强的信号，比起荧光减弱的信号，灵敏度更高。
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公开(公告)号：CN104634775A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510063506.1
申请日：2015-02-06
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
IPC分类号： G01N21/76 , C07D487/22
摘要： 本发明涉及一种基于核酸适配体和锰卟啉催化的化学发光检测蛋白质的方法，解决现有技术中基于核酸适配体的蛋白质检测的方法存在着灵敏度低，稳定性差，步骤繁琐，成本高等缺点的技术问题。方法，包括以下步骤：(1)制备锰卟啉探针；(2)蛋白质检测向化学反应器中加入20mM Tris-HCl，25μM鲁米诺和0.05％Triton X-100，再加入锰卟啉探针，最后加入包含核酸适配体和待测蛋白质的溶液；将所述化学反应器放入化学发光检测器中，最后用微量进样器加入浓度为100mM的H2O2，记录化学发光随时间的变化。该方法是基于核酸适配体诱导的锰卟啉集聚建立的快速、灵敏、特异、简便的蛋白质的检测方法。
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公开(公告)号：CN103063657A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201210567032.0
申请日：2012-12-24
申请人： 中国科学院长春应用化学研究所
IPC分类号： G01N21/76
摘要： 基于化学发光法检测蛋白酶活性及其抑制剂活性的方法，涉及生物分析化学技术领域，解决了现有检测酶活性的方法存在的流路设计复杂、操作繁琐、检测灵敏度低和成本高的问题。基于化学发光法检测蛋白酶活性的方法为：步骤一、将血红素蛋白溶解于Tris-HCl缓冲溶液中，得到血红素蛋白溶液；步骤二、向步骤一中的血红素蛋白溶液中加入不同浓度的蛋白酶，形成反应体系；步骤三、将步骤二中的反应体系注入到流动注射化学发光流路中，与鲁米诺-过氧化氢检测体系发生化学发光反应，对蛋白酶活性进行检测。本发明的方法具有简便、快捷、高灵敏、低成本的优点，能够得到更低的检出限，对胰蛋白酶检出限可以达到1ng/mL。
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