公开(公告)号：CN102337283A

公开(公告)日：2012-02-01

申请号：CN201010239252.1

申请日：2010-07-28

申请人： 中国科学院成都生物研究所

发明人： 李旭东 ,  郝纯 ,  杨俊仕 ,  刘庆华

IPC分类号： C12N15/63 ,  C12N15/65 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/68

摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种双向诱导表达质粒及其构建方法和用途。本发明双向诱导表达质粒载体包含绿色荧光蛋白基因与增强型绿色荧光蛋白基因。采用基因重组的方法构建，使绿色荧光蛋白基因和增强型绿色荧光蛋白基因置于一个酶切位点两边并分别在各自的启动子的调控下，获得双向诱导表达质粒。该双向诱导表达质粒用于底物诱导基因表达筛选及环境因素诱导基因表达筛选中。本发明提高了底物诱导基因表达筛选的效率。

公开(公告)号：CN102268426B

公开(公告)日：2013-06-05

申请号：CN201010190757.3

申请日：2010-06-03

申请人： 中国科学院成都生物研究所

发明人： 李旭东 ,  郝纯 ,  杨俊仕 ,  刘庆华

IPC分类号： C12N15/10

摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，涉及一种环境样品中提取基因组DNA的方法。本发明方法包含包埋、破壁、消化、洗涤、电泳、胶回收、溶解步骤，用悬浮液悬浮环境样品，加入低熔点琼脂糖，室温冷却使凝固；将胶块放入破壁缓冲液中，温育，期间保持水平震荡；倒掉破壁缓冲液，加入消化缓冲液，温育，期间保持水平震荡；倒掉消化缓冲液，加入洗涤液洗涤，再用电泳缓冲液洗涤；将经破壁消化后的胶块切成小块，插入到低熔点琼脂糖凝胶的点样孔中，用低熔点琼脂糖凝胶封好点样孔的空隙后，在电泳缓冲液中电泳；染色后将含DNA的凝胶切下，用电洗脱法回收DNA；将电洗脱后得到的DNA晾干，溶于无菌去离子水或TE溶液，溶解液即为所提的DNA。本发明方法重复性好，操作较为简单，完全能满足建库等分子操作的要求。

公开(公告)号：CN102268426A

公开(公告)日：2011-12-07

申请号：CN201010190757.3

申请日：2010-06-03

申请人： 中国科学院成都生物研究所

发明人： 李旭东 ,  郝纯 ,  杨俊仕 ,  刘庆华

IPC分类号： C12N15/10

摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，涉及一种环境样品中提取基因组DNA的方法。本发明方法包含包埋、破壁、消化、洗涤、电泳、胶回收、溶解步骤，用悬浮液悬浮环境样品，加入低熔点琼脂糖，室温冷却使凝固；将胶块放入破壁缓冲液中，温育，期间保持水平震荡；倒掉破壁缓冲液，加入消化缓冲液，温育，期间保持水平震荡；倒掉消化缓冲液，加入洗涤液洗涤，再用电泳缓冲液洗涤；将经破壁消化后的胶块切成小块，插入到低熔点琼脂糖凝胶的点样孔中，用低熔点琼脂糖凝胶封好点样孔的空隙后，在电泳缓冲液中电泳；染色后将含DNA的凝胶切下，用电洗脱法回收DNA；将电洗脱后得到的DNA晾干，溶于无菌去离子水或TE溶液，溶解液即为所提的DNA。本发明方法重复性好，操作较为简单，完全能满足建库等分子操作的要求。