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公开(公告)号：CN100449005C
公开(公告)日：2009-01-07
申请号：CN200610090148.4
申请日：2006-06-29
申请人： 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及多重荧光PCR检测猪链球菌2型致病性的试剂及方法。更具体地说，本发明提供了同时应用针对猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF)两种毒力因子编码基因设计的荧光PCR引物和探针序列进行猪链球菌2型致病性检测的试剂和方法。本发明采用针对MRP和EF两个基因设计的引物和探针，通过对目的基因序列和标记荧光基团的选择和反应体系、反应条件的优化，组装了检测猪链球菌2型致病性的试剂，建立了对猪链球菌2型菌株致病性进行检测的多重荧光PCR方法，根据扩增曲线即可判定待检菌的致病性。
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公开(公告)号：CN1904079A
公开(公告)日：2007-01-31
申请号：CN200610109569.7
申请日：2006-08-10
申请人： 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及针对猪链球菌2型毒力因子一胞外因子(EF)编码基因设计的用于猪链球菌2型胞外因子(EF)荧光PCR检测的引物和探针序列。本发明针对EF基因设计引物进行PCR，同时在扩增序列中间设计了荧光探针，通过对反应的退火温度和镁离子浓度进行优化，建立了猪链球菌2型胞外因子(EF)多重实时荧光PCR的检测方法。
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公开(公告)号：CN101058833B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200710003456.3
申请日：2007-02-08
申请人： 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
摘要： 本发明提供了用于禽流感病毒检测和分型的引物系统和不对称扩增禽流感病毒RNA的方法。本发明采用根据Genebank中已发表的禽流感病毒所有亚型的基因组序列设计筛选出了25对多重不对称RT-PCR引物、1对通用引物，以及52条特异性探针和3条质控探针，所述25对多重不对称RT-PCR引物其中的每一对各针对禽流感病毒的一种亚型，由所述25对多重不对称RT-PCR引物和1对通用引物组成的引物系统可用于禽流感的检测和分型。进一步，使用所述引物系统建立了不对称扩增禽流感病毒RNA的方法和检测和分型禽流感病毒的方法。通过有效性试验、特异性试验、敏感性试验检测，证明本发明建立的方法特异性强、敏感性高，并进行了初步应用。
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公开(公告)号：CN101058833A
公开(公告)日：2007-10-24
申请号：CN200710003456.3
申请日：2007-02-08
申请人： 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
摘要： 本发明提供了用于禽流感病毒检测和分型的引物系统和不对称扩增禽流感病毒RNA的方法。本发明采用根据Genebank中已发表的禽流感病毒所有亚型的基因组序列设计筛选出了25对多重不对称RT－PCR引物、1对通用引物，以及52条特异性探针和3条质控探针，所述25对多重不对称RT－PCR引物其中的每一对各针对禽流感病毒的一种亚型，由所述25对多重不对称RT－PCR引物和1对通用引物组成的引物系统可用于禽流感的检测和分型。进一步，使用所述引物系统建立了不对称扩增禽流感病毒RNA的方法和检测和分型禽流感病毒的方法。通过有效性试验、特异性试验、敏感性试验检测，证明本发明建立的方法特异性强、敏感性高，并进行了初步应用。
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公开(公告)号：CN1944679A
公开(公告)日：2007-04-11
申请号：CN200610109571.4
申请日：2006-08-10
申请人： 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及针对猪链球菌2型毒力因子一溶菌酶释放蛋白(MRP)编码基因设计的用于猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)荧光PCR检测的引物和探针序列。本发明针对MRP基因设计引物进行PCR，同时在扩增序列中间设计了荧光探针，通过对反应的退火温度和镁离子浓度进行优化，建立了猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)多重实时荧光PCR的检测方法。
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公开(公告)号：CN1908191A
公开(公告)日：2007-02-07
申请号：CN200610090148.4
申请日：2006-06-29
申请人： 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及多重荧光PCR检测猪链球菌2型致病性的试剂及方法。更具体地说，本发明提供了同时应用针对猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF)两种毒力因子编码基因设计的荧光PCR引物和探针序列进行猪链球菌2型致病性检测的试剂和方法。本发明采用针对MRP和EF两个基因设计的引物和探针，通过对目的基因序列和标记荧光基团的选择和反应体系、反应条件的优化，组装了检测猪链球菌2型致病性的试剂，建立了对猪链球菌2型菌株致病性进行检测的多重荧光PCR方法，根据扩增曲线即可判定待检菌的致病性。
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公开(公告)号：CN100467615C
公开(公告)日：2009-03-11
申请号：CN200610109571.4
申请日：2006-08-10
申请人： 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及针对猪链球菌2型毒力因子—溶菌酶释放蛋白(MRP)编码基因设计的用于猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)荧光PCR检测的引物和探针序列。本发明针对MRP基因设计引物进行PCR，同时在扩增序列中间设计了荧光探针，通过对反应的退火温度和镁离子浓度进行优化，建立了猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)多重实时荧光PCR的检测方法。
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公开(公告)号：CN1932034A
公开(公告)日：2007-03-21
申请号：CN200610109572.9
申请日：2006-08-10
申请人： 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明提供了用于检测蛔虫卵的实时荧光PCR引物和探针以及使用其进行检测的方法。蛔虫卵为泡菜等植物源性产品中最容易污染的寄生虫卵，由于数量较少，而且受泡菜汁液的浸泡，因而难以直接借助显微镜进行形态学鉴定。通过设计蛔虫超科寄生虫的引物和探针，从泡菜中分离疑似寄生虫卵，并进行液氮反复冻融的基础上进行荧光PCR操作，可对从泡菜中分离出的疑似蛔虫卵进行鉴定，从而提高了鉴定的准确性。敏感性可以满足单个虫卵的鉴定需要，而且特异性强，与其它寄生虫、植物线虫卵没有交叉反应。
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