公开(公告)号：CN117965615A

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202311559936.3

申请日：2023-11-22

Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所 ,  浙江农林大学

Inventor： 赵树堂 ,  杨松 ,  胡建军 ,  卢孟柱 ,  刘颖丽 ,  宋学勤

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/65 ,  A01H5/06 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种基于根系侵染的黑杨遗传转化方法，属于植物生物工程技术领域；包括：1)采用携带抗除草剂草铵膦筛选标记的表达载体的农杆菌，侵染44号抗虫黑杨带有1‑2cm茎节的无菌幼苗根系，根系剪切成只保留根茎连接处0.2‑0.5cm的根长的结构；2)将侵染后完成共培养的根系放置到含有草铵膦筛选的生根培养基上进行培养；3)将在草铵膦筛选生根培养基上生根的新生根剪切成小段，放置到含有0.8mg/L草铵膦浓度的分化培养基，分化出芽；4)将所述不定芽接种到含有草铵膦筛选的生根培养基上进行培养；5)对所述生根幼苗进行GUS染色鉴定。本发明通过对具有抗性的转基因植株进行再次草铵膦抗性表达载体的农杆菌介导转化，克服了已转基因植株再次转化难以获得阳性苗的约束性，同时缩短了黑杨转化周期至3个月，提高黑杨进行转化的效率至29.03％。本发明将为黑杨分子设计育种提供技术保障。