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公开(公告)号：CN102876800A
公开(公告)日：2013-01-16
申请号：CN201210400763.6
申请日：2012-10-19
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种转植酸酶基因玉米种子或含有该玉米种子的饲料中植酸酶基因的定量检测方法，包括以下步骤：(1)建立转植酸酶基因玉米定量检测标准曲线和线性方程；(2)以待检测样品的DNA为模板，分别以扩增玉米内参基因的一对特异引物、扩增植酸酶基因的一对特异引物或者扩增植酸酶基因表达框中构建载体终止子与基因结合区域的一对特异引物进行实时荧光定量PCR扩增，计算出Ct值差值，将Ct值差值代入所构建的标准曲线和线性方程，得到待检测样品中植酸酶基因的含量。本发明方法能够快速、准确、高通量的测定转基因玉米或添加了转植酸酶基因玉米饲料中的转植酸酶基因的含量，具有操作简便、准确、灵敏度高、避免交叉污染等优点。
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公开(公告)号：CN108424911B
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN201810097695.8
申请日：2018-01-31
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/10 , A01H6/46
摘要： 本发明公开了种子特异性双向启动子及其应用。本发明将种子特异性顺式作用元件插入到玉米来源的胚特异性双向启动子将其改造获得能够驱动报告基因在玉米种子胚和胚乳中同时进行表达的种子特异性双向启动子，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了含有所述种子特异性双向启动子的重组植物表达载体以及重组宿主细胞。本发明所提供的种子特异性双向启动子能够应用于提高作物种子品质或产量、提高作物种子对病虫害抗性以及改良作物性状、构建转基因作物或培育植物新品种等方面。
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公开(公告)号：CN111926036B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN202011093167.9
申请日：2020-10-14
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
摘要： 本发明公开了一种联合表达载体及其在玉米籽粒表达虾青素中的应用。所述表达载体包括pBDEN‑CP‑BZ、pBDEN‑CP‑BZ‑LcyEi和pBDEN‑CP‑CH‑LcyEi。本发明将载体中携带的功能基因及启动子转入玉米，选育的玉米籽粒中虾青素高达100μg/g玉米籽粒干重，是原报道的7倍左右，且虾青素均是以高生物活性的反式虾青素为主，这种富含高品质反式虾青素的玉米新种质将为填补我国虾青素需求缺口开辟新的途径。
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公开(公告)号：CN102876800B
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201210400763.6
申请日：2012-10-19
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种转植酸酶基因玉米种子或含有该玉米种子的饲料中植酸酶基因的定量检测方法，包括以下步骤：(1)建立转植酸酶基因玉米定量检测标准曲线和线性方程；(2)以待检测样品的DNA为模板，分别以扩增玉米内参基因的一对特异引物、扩增植酸酶基因的一对特异引物或者扩增植酸酶基因表达框中构建载体终止子与基因结合区域的一对特异引物进行实时荧光定量PCR扩增，计算出Ct值差值，将Ct值差值代入所构建的标准曲线和线性方程，得到待检测样品中植酸酶基因的含量。本发明方法能够快速、准确、高通量的测定转基因玉米或添加了转植酸酶基因玉米饲料中的转植酸酶基因的含量，具有操作简便、准确、灵敏度高、避免交叉污染等优点。
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公开(公告)号：CN102352406B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201110326940.6
申请日：2011-10-25
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12Q1/44
摘要： 本发明公开了一种高通量测定转植酸酶作物种子中植酸酶活性的方法，该方法包括：（1）、以磷含量为横坐标，吸光值为纵坐标，建立磷标准曲线；（2）、将待检测样品中的植酸酶浸提出来，得到植酸酶的浸提液；（3）、将植酸酶的浸提液在96孔微孔板中进行植酸酶的酶活性测定反应；（4）、测定反应溶液的吸光值，对应磷标准曲线建立的直线回归方程计算出各个待测样品中的磷浓度，再依据酶活计算公式计算出待检测样品的植酸酶活性。准确度和灵敏度试验结果表明，本发明方法测定结果准确性好、误差小、稳定性高、重复性好，变异系数也远低于现有的微板法。本发明检测方法具有高通量、检测效率高、操作简便、成本低、准确性高等优点。
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公开(公告)号：CN116676307B
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202310636341.7
申请日：2023-06-01
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所 , 青岛农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/06 , A01H5/10 , A01H6/46 , C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种玉米根的维管束及分生组织高效表达启动子及其应用。所述ZmIRT1启动子的多核苷酸序列如序列表SEQ ID No：1。本发明克隆了ZmIRT1的启动子，并发现该启动子驱动的外源基因主要表达在植物根的维管束及分生组织中。通过该启动子对农作物品种进行基因改造，如通过该启动子调控目标基因在根的维管束及分生组织中高效表达，将有助于阐明玉米运流的生理机制，为玉米高产奠定生理基础。
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公开(公告)号：CN116751792A
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202311017631.X
申请日：2023-08-14
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
摘要： 本发明公开了一种转录因子下游基因筛选方法（PER‑seq）。该方法首先制备原生质体，然后将转录因子‑报告基因及空载报告基因分别在原生质体中瞬时表达，最后收集转化成功的细胞，进行转录组测序，分析差异表达基因，筛选目标转录因子的下游靶基因。本发明建立了一种简单快速、高效广适，且不依赖于突变体或过表达转基因株系的转录因子下游调控基因挖掘方法，为解析植物转录调控机制提供了技术支撑。
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公开(公告)号：CN116676307A
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202310636341.7
申请日：2023-06-01
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所 , 青岛农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/06 , A01H5/10 , A01H6/46 , C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种玉米根的维管束及分生组织高效表达启动子及其应用。所述ZmIRT1启动子的多核苷酸序列如序列表SEQ ID No：1。本发明克隆了ZmIRT1的启动子，并发现该启动子驱动的外源基因主要表达在植物根的维管束及分生组织中。通过该启动子对农作物品种进行基因改造，如通过该启动子调控目标基因在根的维管束及分生组织中高效表达，将有助于阐明玉米运流的生理机制，为玉米高产奠定生理基础。
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公开(公告)号：CN108424911A
公开(公告)日：2018-08-21
申请号：CN201810097695.8
申请日：2018-01-31
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
摘要： 本发明公开了种子特异性双向启动子及其应用。本发明将种子特异性顺式作用元件插入到玉米来源的胚特异性双向启动子将其改造获得能够驱动报告基因在玉米种子胚和胚乳中同时进行表达的种子特异性双向启动子，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了含有所述种子特异性双向启动子的重组植物表达载体以及重组宿主细胞。本发明所提供的种子特异性双向启动子能够应用于提高作物种子品质或产量、提高作物种子对病虫害抗性以及改良作物性状、构建转基因作物或培育植物新品种等方面。
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公开(公告)号：CN102352406A
公开(公告)日：2012-02-15
申请号：CN201110326940.6
申请日：2011-10-25
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12Q1/44
摘要： 本发明公开了一种高通量测定转植酸酶作物种子中植酸酶活性的方法，该方法包括：（1）以磷含量为横坐标，吸光值为纵坐标，建立磷标准曲线；（2）将待检测样品中的植酸酶浸提出来，得到植酸酶的浸提液；（3）将植酸酶的浸提液在96孔微孔板中进行植酸酶的酶活性测定反应；（4）测定反应溶液的吸光值，对应磷标准曲线建立的直线回归方程计算出各个待测样品中的磷浓度，再依据酶活计算公式计算出待检测样品的植酸酶活性。准确度和灵敏度试验结果表明，本发明方法测定结果准确性好、误差小、稳定性高、重复性好，变异系数也远低于现有的微板法。本发明检测方法具有高通量、检测效率高、操作简便、成本低、准确性高等优点。
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