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公开(公告)号：CN117143832B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311434112.3
申请日：2023-11-01
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种抗虫蛋白Cry 1Ah杂交瘤细胞株及其产生的抗体和应用，所述杂交瘤细胞株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.45482。其制备方法包括：a)纯化原核表达的Cry 1Ah重组蛋白；b)将Cry 1Ah重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠；c)收集免疫BALB/c小鼠的脾细胞并与SP2/0细胞进行融合；d)通过有限稀释法进行亚克隆，亚克隆5‑7天进行ELISA检测，直至筛选出稳定分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株进行扩大再培养和保存。本发明的杂交瘤细胞株分泌的单抗为实现转基因作物中抗虫蛋白Cry 1Ah的检测奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116047047B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202211329917.7
申请日：2022-10-27
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C07K16/00
摘要： 一种定量检测转基因玉米中抗虫蛋白Cry 1F的酶联免疫试剂盒及其检测方法，所述酶联免疫试剂盒由包被捕获抗体的微孔反应板、样品处理液、生物素标记的检测抗体、标准品、辣根过氧化物酶标记的亲和素、生物素标记的抗体稀释液、辣根过氧化物酶标记的亲和素稀释液、浓缩洗涤液、底物溶液、终止液和板贴组成，从而具有操作简便、能同时快速检测大批样品，具有高灵敏度、高特异性的特点。
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公开(公告)号：CN117143831A
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202311422492.9
申请日：2023-10-31
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种抗虫蛋白Cry 1Ah杂交瘤细胞株及其产生的抗体和应用，所述杂交瘤细胞株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.45483。其制备方法包括：a)纯化原核表达的Cry 1Ah重组蛋白；b)将Cry 1Ah重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠；c)收集免疫BALB/c小鼠的脾细胞并与SP2/0细胞进行融合；d)通过有限稀释法进行亚克隆，亚克隆5‑7天进行ELISA检测，直至筛选出稳定分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株进行扩大再培养和保存。本发明的杂交瘤细胞株分泌的单抗为实现转基因作物中抗虫蛋白Cry 1Ah的检测奠定了基础。
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公开(公告)号：CN114371285A
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202111622904.4
申请日：2021-12-28
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： G01N33/558 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/68
摘要： 本发明提供了一种胶体金免疫层析速测试纸条，所述试纸条包括底板以及粘着在底板上依次相连的样品垫、金标垫、反应膜和吸水垫，所述金标垫包被抗虫蛋白Cry 3Bb单克隆抗体‑胶体金结合物，该试纸条特异性强，灵敏度高，并且，操作简便、快速、准确，适用于转基因玉米及其产品中抗虫蛋白Cry 3Bb的现场快速检测以及安全性评价。
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公开(公告)号：CN112326969A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011160092.1
申请日：2020-10-26
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： G01N33/58 , G01N33/577 , G01N33/573 , G01N33/543
摘要： 一种定量检测抗除草剂蛋白PAT/pat的酶联免疫试剂盒，所述酶联免疫试剂盒由包被捕获抗体的微孔反应板、样品处理液、生物素标记的检测抗体、标准品、辣根过氧化物酶标记的亲和素、生物素标记的抗体稀释液、辣根过氧化物酶标记的亲和素稀释液、浓缩洗涤液、底物溶液、终止液和板贴组成，本发明试剂盒成本低，主要试剂均以工作液形式提供，操作简便，能同时快速检测大批样品；具有高灵敏度、高特异性的特点；是目前国内乃至国际首个能定量特异检测转基因玉米中抗除草剂蛋白PAT/pat的试剂盒。
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公开(公告)号：CN117147882A
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202311422609.3
申请日：2023-10-31
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/535 , C07K16/12 , C12N5/20
摘要： 本发明公开了一种定量检测转基因玉米中抗虫蛋白Cry 1Ah的酶联免疫试剂盒及其检测方法，所述酶联免疫试剂盒包括捕获抗体和检测抗体，所述的捕获抗体为由保藏编号为CGMCC No.45482的杂交瘤细胞株2G11 1C7分泌得到，所述的检测抗体由保藏编号为CGMCC No.45483的杂交瘤细胞株3C4 2E6分泌得到。本发明的酶联免疫试剂盒及其检测方法具有操作简便、能同时快速检测大批样品、高灵敏度、高特异性的特点。
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公开(公告)号：CN117143832A
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202311434112.3
申请日：2023-11-01
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种抗虫蛋白Cry 1Ah杂交瘤细胞株及其产生的抗体和应用，所述杂交瘤细胞株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.45482。其制备方法包括：a)纯化原核表达的Cry 1Ah重组蛋白；b)将Cry 1Ah重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠；c)收集免疫BALB/c小鼠的脾细胞并与SP2/0细胞进行融合；d)通过有限稀释法进行亚克隆，亚克隆5‑7天进行ELISA检测，直至筛选出稳定分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株进行扩大再培养和保存。本发明的杂交瘤细胞株分泌的单抗为实现转基因作物中抗虫蛋白Cry 1Ah的检测奠定了基础。
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公开(公告)号：CN114250318B
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202210086276.0
申请日：2022-01-25
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种转基因玉米BBL2‑2转化体特异性定量PCR检测引物、检测方法。特异性引物对为：BBL2‑2‑qF，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示；BBL2‑2‑qR，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示。特异性探针为：BBL2‑2‑P，其序列如序列表SEQ ID No.3。采用本发明的引物对与探针进行实时荧光定量PCR反应，可以鉴定样品中是否含有转基因玉米BBL2‑2品系，并能对其含量进行准确定量。
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公开(公告)号：CN115094042A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210614576.1
申请日：2022-05-30
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/16 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要： 一种PAT/pat单抗杂交瘤细胞株及其产生的抗体和应用，本发明利用工程菌株表达、纯化得到的高纯度抗除草剂蛋白PAT/pat作为抗原，通过杂交瘤技术制备了PAT/pat单抗杂交瘤细胞株PA1‑18030031/1B6 2D3和PAT/pat单抗杂交瘤细胞株PA1‑18030031/1F5 2F2，细胞株分泌单抗腹水纯化后得到的抗体间接ELISA效价分别为1:1792000和1:1024000，该单抗可以特异性识别原核表达的重组PAT/pat蛋白及转基因玉米中的内源PAT/pat蛋白，分泌抗PAT/pat抗除草剂蛋白的鼠单抗杂交瘤细胞株的构建为转基因玉米中该蛋白的检测提供了物质和技术支撑。
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公开(公告)号：CN112342198A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011158516.0
申请日：2020-10-26
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
摘要： 一种PAT/pat单抗杂交瘤细胞株、产生的抗体及其制备方法，本发明利用工程菌株表达、纯化得到的高纯度抗除草剂蛋白PAT/pat作为抗原，通过杂交瘤技术制备了分泌抗PAT/pat的特异、灵敏单抗的PAT/pat单抗杂交瘤细胞株和PAT/pat单抗杂交瘤细胞株，细胞株分泌单抗腹水纯化后得到的抗体间接ELISA效价分别为1:1792000和1:1024000，抗体亚型均为IgG1，该单抗可以特异识别原核表达的重组PAT/pat蛋白及转基因玉米中的内源PAT/pat蛋白，分泌抗PAT/pat抗除草剂蛋白的鼠单抗杂交瘤细胞株的构建为转基因玉米中该蛋白的检测提供了物质和技术支撑。
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