羊种布鲁菌16M LPS的制备方法及其单克隆抗体的筛选鉴定方法和应用

    公开(公告)号:CN110028594A

    公开(公告)日:2019-07-19

    申请号:CN201910170632.5

    申请日:2019-03-07

    Abstract: 羊种布鲁菌16M LPS的制备方法及其单克隆抗体的筛选鉴定方法和应用,涉及单克隆抗体制备领域。本发明用酚水法提取羊种布鲁菌16M的LPS,纯化后用其免疫Balb/c小鼠;将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合;间接ELISA方法筛选出两株阳性杂交瘤细胞株;制备两株羊种布鲁菌16M LPS单克隆抗体,亚型为IgG3和IgG1,轻链类型为κ型,浓度为1.02和2.10mg/ml,亲和常数为1.12×109和1.11×109,效价为1:6400和1:12800,其纯度和效价高,亲和性好,结合能力强,特异性和敏感性好,抗体包被10分钟便可与布鲁菌发生特异性结合,免疫荧光试验可观察到现明显的荧光。

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