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公开(公告)号：CN104774874B
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201510187525.5
申请日：2015-04-20
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
IPC: C12N15/867 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种鹿茸生物反应器的构建方法，属于基因工程技术领域。本发明所提供的方法为制备含有外源基因的慢病毒颗粒，将慢病毒颗粒结合磁性载体后感染生茸区骨膜，检测标记基因或外源基因的表达情况，获得鹿茸生物反应器。本发明可以人为改造鹿茸中有益成分，提高鹿茸中软骨成分的含量，提高鹿茸蜡片产量，提高鹿茸的附加值促进农户增收；还可以提高鹿茸中某种有益成分的含量；本发明生成的鹿茸生物反应器，可以随着鹿茸每年周期性再生，重复获取，即一次改造终身有效；本发明对鹿个体改造仅局限于决定鹿茸生成的骨膜组织，外源基因仅表达与后生的鹿茸组织中，更符合动物伦理要求。本发明适用于构建鹿茸生物反应器。
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公开(公告)号：CN104560875B
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201410826389.5
申请日：2014-12-26
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
IPC: C12N5/079
Abstract: 本发明公开了一种哺乳动物三叉神经节细胞的体外分离培养方法及应用，属于细胞生物学和神经生物学技术领域。本发明所提供的方法为将哺乳动物三叉神经组织置于含有L‑15培养液的培养皿上进行清洗处理，剪碎后依次用十一型胶原酶、胰蛋白酶和胰蛋白酶‑EDTA进行消化处理，细胞筛过滤后对滤液进行密度梯度离心，悬浮后接种于包被好的细胞培养装置内，用基础神经培养基进行培养。本发明方法大大降低了组织处理过程中对细胞的损伤，去除了消化过程中大量细胞碎片以及其他细胞类型等杂质干扰，大大提高了细胞的纯度，可获百万个较纯的三叉神经细胞，提高了细胞产量和质量，适用于哺乳动物三叉神经节细胞的体外分离培养。
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公开(公告)号：CN104450858A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410794830.6
申请日：2014-12-18
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
IPC: C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种鉴定参与毛发发育细胞的方法及应用，属于毛发发育技术领域。本发明所提供的方法是先分别分离培养待测细胞和毛乳头细胞，再分别将毛乳头细胞和待测细胞接种到插入式培养皿的上下表面进行共培养，同时单独培养毛乳头细胞，培养结束后测定单独培养的毛乳头细胞团平均直径和共培养细胞团平均直径，再根据判定公式判定待测细胞是否参与毛发发育。本发明所提供的方法首次实现了通过待测细胞与毛乳头细胞共培养的方式，来鉴定待测细胞是否参与毛发发育，培养条件更加接近生物体内环境，克服了现有技术中仅仅通过单一或几个基因或化学试剂来研究所带来的比较片面的问题。
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公开(公告)号：CN107515271A
公开(公告)日：2017-12-26
申请号：CN201710719033.5
申请日：2017-08-21
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
CPC classification number: G01N31/002 , G01N31/16
Abstract: 本发明公开了一种鹿茸分区方法，属于中药原材料等级划分技术领域。本发明方法如下：一、将鹿茸切下完整的一片，获得切片鹿茸；二、将步骤一获得的切片鹿茸烘干后粉碎，获得鹿茸粉；三、准确称取两份步骤二获得的鹿茸粉，分别测定鹿茸粉中的蛋白质含量和钙含量；四、按照分区值(PV)计算公式：PV＝蛋白质含量/钙含量×104计算该切片鹿茸的分区值(PV)，根据分区值判定该切片鹿茸所属的区段。本发明提供了一个科学的、公认的、合理的鹿茸分区方法，尤其适用于鹿茸过渡区段的分区鉴定。本发明方法为每个区段设立了数据化的硬性区分标准，不仅避免了主观判断的失误，同时又能很好的适用于任何发育阶段的鹿茸和鹿茸的任何分支。
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公开(公告)号：CN111778206B
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202010553580.2
申请日：2020-06-17
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
IPC: C12N5/0775 , C12N5/077 , C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种抗皮肤衰老的鹿茸干细胞条件培养液的制备方法，属于组织工程技术领域。本发明解决了现有鹿茸干细胞具有储存和运输不便，且存在免疫排斥反应和促进肿瘤细胞转移和刺激上皮‑间质细胞转化的问题。本发明包括鹿茸干细胞的原代分离培养、传代培养、条件培养液的收集、保存、处理、冻干等步骤。本发明的方法获得的鹿茸干细胞条件培养液中含有大量的细胞因子、生长因子、miRNA、mRNAs等多种成分，这些因子可短期或长期参与细胞交流、细胞信号转导、细胞或组织代谢改变等生理过程，能够清除DPPH自由基，清除率可达74.63％‑82.45％，且对于人角质形成细胞和真皮成纤维细胞增殖具有促进作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111826340B
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202010664385.7
申请日：2020-07-10
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗皮肤衰老的鹿茸干细胞外泌体的制备方法及其应用，属于组织工程技术领域。本发明针对如何解决抗皮肤衰老问题，提供一种外泌体，所述的外泌体为鹿茸干细胞外泌体。本发明包括鹿茸干细胞外泌物中含有大量的细胞因子、生长因子、miRNA、mRNAs等多种成分，易与邻近细胞的细胞膜发生融合，将生物学活性物质选择性地递送至受体细胞，在不同细胞间进行信息传递，调节细胞间的信号传导。并且本申请的方法获得的鹿茸干细胞外泌物与人骨髓间充质干细胞相比，鹿茸干细胞容易获取，增殖速度是人骨髓间充质快十几倍，能够清除DPPH自由基，具有抗氧化功能，且对Hacat细胞和NHDF细胞的增殖均具有显著的促进作用。
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公开(公告)号：CN104805123B
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201510267324.6
申请日：2015-05-22
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
IPC: C12N15/867 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种鹿茸骨膜组织的转基因方法，属于基因工程技术领域。本发明所提供的方法是利用脂质体包裹携带标记基因的病毒质粒，再将包裹后的病毒质粒转染到包装细胞中生成病毒颗粒，收集含病毒颗粒的细胞培养液上清液，浓缩后保存备用，采集鹿茸的骨膜组织，切割后利用包装好的病毒颗粒进行感染，最后将经过病毒感染的鹿茸骨膜组织移植到动物体内，鹿茸萌发后获得转基因鹿茸组织。
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公开(公告)号：CN104805123A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510267324.6
申请日：2015-05-22
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
IPC: C12N15/867 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种鹿茸骨膜组织的转基因方法，属于基因工程技术领域。本发明所提供的方法是利用脂质体包裹携带标记基因的病毒质粒，再将包裹后的病毒质粒转染到包装细胞中生成病毒颗粒，收集含病毒颗粒的细胞培养液上清液，浓缩后保存备用，采集鹿茸的骨膜组织，切割后利用包装好的病毒颗粒进行感染，最后将经过病毒感染的鹿茸骨膜组织移植到动物体内，鹿茸萌发后获得转基因鹿茸组织。
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公开(公告)号：CN104774874A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510187525.5
申请日：2015-04-20
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
IPC: C12N15/867 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种鹿茸生物反应器的构建方法，属于基因工程技术领域。本发明所提供的方法为制备含有外源基因的慢病毒颗粒，将慢病毒颗粒结合磁性载体后感染生茸区骨膜，检测标记基因或外源基因的表达情况，获得鹿茸生物反应器。本发明可以人为改造鹿茸中有益成分，提高鹿茸中软骨成分的含量，提高鹿茸蜡片产量，提高鹿茸的附加值促进农户增收；还可以提高鹿茸中某种有益成分的含量；本发明生成的鹿茸生物反应器，可以随着鹿茸每年周期性再生，重复获取，即一次改造终身有效；本发明对鹿个体改造仅局限于决定鹿茸生成的骨膜组织，外源基因仅表达与后生的鹿茸组织中，更符合动物伦理要求。本发明适用于构建鹿茸生物反应器。
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公开(公告)号：CN111826340A
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN202010664385.7
申请日：2020-07-10
Applicant: 中国农业科学院特产研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗皮肤衰老的鹿茸干细胞外泌体的制备方法及其应用，属于组织工程技术领域。本发明针对如何解决抗皮肤衰老问题，提供一种外泌体，所述的外泌体为鹿茸干细胞外泌体。本发明包括鹿茸干细胞外泌物中含有大量的细胞因子、生长因子、miRNA、mRNAs等多种成分，易与邻近细胞的细胞膜发生融合，将生物学活性物质选择性地递送至受体细胞，在不同细胞间进行信息传递，调节细胞间的信号传导。并且本申请的方法获得的鹿茸干细胞外泌物与人骨髓间充质干细胞相比，鹿茸干细胞容易获取，增殖速度是人骨髓间充质快十几倍，能够清除DPPH自由基，具有抗氧化功能，且对Hacat细胞和NHDF细胞的增殖均具有显著的促进作用。
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