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公开(公告)号：CN119700367A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202411790662.3
申请日：2024-12-06
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种提高奶牛定时输精效率的方法，牛产后第n（n为33‑39）天首次注射GnRH，同时埋置CIDR；第n+7天，首次注射PG，同时撤出CIDR；第n+7+3天，第二次注射GnRH；第n+7+3+7天，第三次注射GnRH；第n+7+3+7+5天，再次注射PG；再次注射PG 56h后，进行第四次GnRH注射；在第四次GnRH注射后14‑16h，进行人工输精；在人工输精后第7天进行第五次GnRH注射，在人工输精后第15天晚上、第16天早上分别注射酮洛芬。该方法能显著提高奶牛定时输精妊娠率，也能提高热应激条件下奶牛定时输精妊娠率，对于保障奶牛养殖企业的健康发展具有重要的经济价值和社会价值。
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公开(公告)号：CN101724700B
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN200910242827.2
申请日：2009-12-17
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种检测牛肌肉生长抑制素基因(myostatin)第三外显子单核苷酸多态性(SNP)的快速检测方法，该方法针对myostatin基因第三外显子的G→A突变，设计了分别扩增G938A单碱基多态位点上游序列和下游序列的两组PCR引物对，其中各有一条为针对突变位点的错配引物，该引物的3’末端位于突变位点上。利用所述引物，不同牛DNA样品可以得到不同扩增结果，从而判断牛myostatin基因第三外显子的多态性。本发明方法成本低廉、操作简单、快速、准确并适合于推广应用，对快速准确地进行肉牛的标记辅助选择，加快肉牛选育进程及分子生物学领域快速的PCR检测方法研究有着重要意义。
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公开(公告)号：CN101892309B
公开(公告)日：2012-12-19
申请号：CN201010182747.5
申请日：2010-05-19
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种检测牛或牛早期胚胎性别的引物及其应用。利用牛牙釉基因在两个性染色体上的等位基因存在序列长度多态特点，在相应位点上设计了一对引物，所述引物包括SEQ ID NO.1和2所示的核苷酸序列，本发明利用上述引物采用快速PCR方法对牛早期胚胎进行扩增检测，可在雄性胚胎中检测到长约395bp的Y染色体特异产物条带和长约458bp的X染色体特异产物条带，但只能在雌性胚胎中检测到长约458bp的X染色体特异产物条带。本方法只通过一对引物的PCR扩增，在任意胚胎细胞中均能扩增出性别特异PCR产物，不需设计内标引物，即可实现对被检个体的性别鉴定，成本低廉，操作简便且快速、准确，避免了传统双重PCR方法和巢式PCR方法的复杂操作和较复杂扩增条件的摸索。
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公开(公告)号：CN114540283B
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202210101366.2
申请日：2022-01-27
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种用于牛体外胚胎生产的高效玻璃化冷冻方法。本发明首次将β‑烟酰胺单核苷酸应用于牛体外胚胎生产中的牛IVF胚胎玻璃化冷冻技术中，通过在牛卵母细胞体外成熟液和牛体外受精胚胎培养液中添加一定浓度的β‑烟酰胺单核苷酸，然后将牛体外胚胎进行玻璃化冷冻，能够极大地提高牛IVF胚胎的玻璃化冷冻效率。进一步向牛卵母细胞体外成熟液和牛体外受精胚胎培养液中按比例添加生长因子和缝隙链接蛋白可进一步提高玻璃化冷冻效率。更进一步地，通过向玻璃化冷冻液中添加一定浓度的纳米颗粒可有助于进一步提高玻璃化冷冻效率。
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公开(公告)号：CN108588011A
公开(公告)日：2018-09-28
申请号：CN201810432524.6
申请日：2018-05-08
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种提高玻璃化冷冻牛卵母细胞体外受精能力的方法。本发明在玻璃化冷冻处理前，将牛卵母细胞采用含有钆和CLC的溶液联合处理，再进行玻璃化冷冻；解冻后采用甲基化-β-环糊精处理，而后进行体外受精。结果表明，该方法能够显著提高玻璃化冷冻牛卵母细胞的卵裂率和囊胚率，并且高于新鲜牛卵母细胞的体外受精效率，具有广泛的应用前景，值得推广。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107227292A
公开(公告)日：2017-10-03
申请号：CN201710412108.5
申请日：2017-06-02
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明提供一种提高牛类胚胎干细胞形成效率及阳性克隆比例的方法，其是在牛体外受精胚胎培养液、干细胞培养液中添加10‑11～10‑7M(优选10‑9M)的褪黑素。该方法能够显著提高牛类ESCs克隆生成效率及第10代类ESCs克隆碱性磷酸酶(AP)染色阳性率和表面标记(OCT4和NANOG、SOX2)阳性率，并能够降低第10代类ESCs克隆中OCT4、NANOG、SOX2基因甲基化水平并提高其mRNA表达水平。采用本发明方法可以有效提高牛类ESCs的形成效率及阳性克隆水平。本方法操作简单、成本低，将在牛ESCs研究领域发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN102824226B
公开(公告)日：2015-10-21
申请号：CN201210343103.9
申请日：2012-09-14
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: A61D7/00
Abstract: 本发明公开了一种精原干细胞移植受体制备的方法，该方法通过睾丸注射白消安制备精原干细胞移植受体。应用本发明方法，不但能够成功快速制备精原干细胞移植受体，降低腹腔注射白消安法对动物骨髓、造血系统所造成的较大伤害，减少或避免动物死亡，还能减少药物使用量，降低成本。这种方法开辟出了一种新型精原干细胞移植受体制备方法。该方法不涉及任何专用仪器，只利用现有常规仪器和化学试剂即可完成，本领域的一般技术人员均可实施本发明，是一种成本低廉，操作简便、高效、快速、安全、可行的精原干细胞移植受体制备方法，有助于精原干细胞移植技术的推广应用及优化创新。
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公开(公告)号：CN104886040A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510119500.1
申请日：2015-03-18
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种高效保护玻璃化冷冻牛卵母细胞线粒体功能的方法，该方法是在牛卵母细胞体外成熟液、玻璃化冷冻液中添加10-9M褪黑素(MT)，经该方法冷冻的牛卵母细胞中ATP含量及其体外发育能力与新鲜卵母细胞无显著性差异。应用本发明方法可以提高冷冻卵母细胞的发育能力和应用范围。本发明的方法操作简、成本低，将在牛卵母细胞冷冻保存方面发挥巨大作用。
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公开(公告)号：CN101935698B
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201010182763.4
申请日：2010-05-19
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种检测牛单精子性别或牛分离精液中X、Y精子纯度的引物及其应用。所述引物包括SEQ ID NO.1和2所示的核苷酸序列，本发明利用上述引物采用快速PCR方法进行扩增检测，利用两个染色体特异扩增产物长度的差异通过琼脂糖凝胶电泳结果进行单个精子性别鉴定；通过对分离精液中分离的各单个牛精子进行简单PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳，然后根据对单个精子性别检测结果的统计分析，对分离精子纯度做出最终评价。该方法在任意精子细胞中均能扩增出特异PCR产物，不需设计内标引物，是一种成本低廉，操作简便、快速、准确的鉴定牛X、Y精子分离纯度的技术，为后续性控精液的推广应用及精子分离方法的优化与创新提供了可靠、必要的技术支持。
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公开(公告)号：CN120052305A
公开(公告)日：2025-05-30
申请号：CN202510212418.7
申请日：2025-02-25
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种提高夏季条件下奶牛定时输精效率的方法，通过给牛施用如下手段中的至少3种，来提高夏季条件下奶牛定时输精效率；所述手段包括：注射GnRH、注射PG、注射eCG、注射hCG、注射酮洛芬、注射A3、埋置CIDR。实验表明，使用CIDR、eCG、hCG、酮洛芬等显著提高热应激条件下奶牛定时输精效率，进而提高夏季条件下奶牛繁殖力，对于保障奶牛养殖业的健康发展具有重要的经济价值和社会价值。
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