一种大型实验动物功能基因表达载体构建的方法

    公开(公告)号:CN103266123A

    公开(公告)日:2013-08-28

    申请号:CN201310111110.0

    申请日:2013-04-02

    Abstract: 本发明利用原核表达载体pET22b为基础载体进行设计、载体构建及功能验证,最终获得高表达率、高穿膜率的大型实验动物功能基因表达载体,属于细胞与分子生物学领域。本发明构建的功能基因表达载体含有的酶切位点数量多,基因选择范围大;可精确调控目的基因的体外转录水平,且表达的蛋白可导入哺乳动物细胞,转导效率高,转导作用迅速,适于基因功能研究。本发明涉及的大型实验动物功能基因表达载体可以为基因工程、细胞工程、免疫学和分子生物学等生命科学研究提供便捷有效的基因运载工具;也可为大型实验动物的遗传调控机制研究提供新途径。

    用于双峰驼线粒体DNA异质性的检测方法

    公开(公告)号:CN103131783A

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN201310073218.5

    申请日:2013-03-07

    Abstract: 本发明涉及一种用于双峰驼线粒体DNA异质性的检测方法,包括以下步骤:(1)扩增线粒体DNA异质性片段:根据双峰驼线粒体D-loop区序列,在相对保守区域设计一对引物,扩增该重复片度;PCR扩增体系为20μL,反应程序为:95℃预变性5min,94℃变性45s,62℃退火1min,72℃延伸1min,72℃延伸15min,35个循环;(2)DNA测序仪片段分析:经琼脂糖凝胶电泳检测合格后,稀释并上DNA测序仪进行片段分析;GeneMapper软件分析原始数据,进行标准曲线校对和片段分析。本发明的检测方法时间短、灵敏度高、分辨率高(可以区分1bp的差异)、适合大批量检测,可快速、批量进行400bp以内的专用于双峰驼线粒体DNA异质性分析。

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