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公开(公告)号：CN116262781B
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202111521669.1
申请日：2021-12-13
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了抗菌肽defensin衍生物及其原核表达方法与应用。本发明通过RACE PCR的方法从大麦虫扩增出抗菌肽defensin基因编码区，通过原核表达获得了具有良好抗菌活性的重组大麦虫defensin，实现了抗菌肽defensin体外表达。然后利用生物合成技术制备了大麦虫defensin衍生物，序列如SEQ ID NO:3～8所示。试验证实重组defensin及其衍生物ZM‑d14CFR对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有良好的抗菌活性，且无细胞毒性和溶血性，是理想的抗菌物质，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN109425735A
公开(公告)日：2019-03-05
申请号：CN201710792634.9
申请日：2017-09-05
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/569 , G01N33/535
Abstract: 本发明提供了一种检测猪沙门菌抗体的试剂盒，该试剂盒包括抗原蛋白，所述抗原蛋白为fljB蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，本发明的fljB蛋白抗原性良好，特异性强、纯度和产量高；试剂盒中抗原蛋白的包被浓度为20μg/mL，阴阳性血清的稀释倍数为1:200。本发明的试剂盒能够用于临床样本中猪沙门菌fljB抗体的快速检测。本发明试剂盒弥补了目前缺乏单一抗原对沙门菌感染进行诊断的不足，降低了漏检率，精密度也更高，为我国猪群中沙门菌的流行病学调查提供了敏感的检测手段，可用于猪沙门菌感染的早期诊断。
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公开(公告)号：CN118516389B
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410969181.2
申请日：2024-07-19
Applicant: 中国农业大学三亚研究院
Abstract: 本发明公开了一种Zophobas atratus防御素高效信号肽筛选菌株的构建方法，属于生物技术领域。本发明采用的步骤如下：（一）重组表达载体的构建；（二）构建基因工程菌；（三）诱导表达和产物鉴定。本发明通过构建Zophobas atratus防御素高效信号肽菌株，通过原核表达技术获得天然抗菌肽，克服了生产成本高，在本体动物中提取产量低的问题，并使其成为畜牧养殖中抗生素有效替代品。本发明筛选了表达宿主枯草芽孢杆菌五种信号肽，并提高其产量，同时验证了目标蛋白对多种多重耐药致病菌的抑制活性。
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公开(公告)号：CN116262782B
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202111522903.2
申请日：2021-12-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K1/22 , A61K38/17 , A61P31/04 , A61P15/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了抗菌肽coleoptericin及其原核表达方法与应用。本发明通过RACE PCR的方法首次扩增出大麦虫coleoptericin完整的CDs序列，采用原核表达载体构建包含抗菌肽coleoptericin的编码基因的重组载体，实现了抗菌肽coleoptericin的原核表达，获得的重组抗菌肽在纯化后具有明显的体外抑菌效果，且在高浓度情况下无溶血性和细胞毒性，安全性良好。抗菌肽coleoptericin还可有效抑制小鼠乳腺炎模型中肺炎克雷伯菌的繁殖，对肺炎克雷伯菌性乳腺炎具有良好的治疗作用。
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公开(公告)号：CN116262782A
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202111522903.2
申请日：2021-12-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K1/22 , A61K38/17 , A61P31/04 , A61P15/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了抗菌肽coleoptericin及其原核表达方法与应用。本发明通过RACE PCR的方法首次扩增出大麦虫coleoptericin完整的CDs序列，采用原核表达载体构建包含抗菌肽coleoptericin的编码基因的重组载体，实现了抗菌肽coleoptericin的原核表达，获得的重组抗菌肽在纯化后具有明显的体外抑菌效果，且在高浓度情况下无溶血性和细胞毒性，安全性良好。抗菌肽coleoptericin还可有效抑制小鼠乳腺炎模型中肺炎克雷伯菌的繁殖，对肺炎克雷伯菌性乳腺炎具有良好的治疗作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109425735B
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN201710792634.9
申请日：2017-09-05
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K14/255 , G01N33/558
Abstract: 本发明提供了一种检测猪沙门菌抗体的试剂盒，该试剂盒包括抗原蛋白，所述抗原蛋白为fljB蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，本发明的fljB蛋白抗原性良好，特异性强、纯度和产量高；试剂盒中抗原蛋白的包被浓度为20μg/mL，阴阳性血清的稀释倍数为1:200。本发明的试剂盒能够用于临床样本中猪沙门菌fljB抗体的快速检测。本发明试剂盒弥补了目前缺乏单一抗原对沙门菌感染进行诊断的不足，降低了漏检率，精密度也更高，为我国猪群中沙门菌的流行病学调查提供了敏感的检测手段，可用于猪沙门菌感染的早期诊断。
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公开(公告)号：CN109837299A
公开(公告)日：2019-06-04
申请号：CN201711211382.2
申请日：2017-11-28
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9技术敲除牛乳腺上皮细胞NLRP3炎性体接头蛋白ASC基因的方法。根据牛乳腺上皮细胞NLRP3炎性体接头蛋白ASC基因序列，构建基于CRISPR/Cas9系统的sgRNA表达载体，以此作为ASC基因打靶载体，转入牛乳腺上皮细胞中，获得ASC基因敲除的牛乳腺上皮细胞，可作为理想的用于研究奶牛乳腺炎性损伤以及奶牛乳腺炎的细胞模型，在奶牛乳腺炎的诊断试剂和药物筛选方面发挥应用。
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公开(公告)号：CN119039392A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202410151840.1
申请日：2024-02-02
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K7/08 , A23L3/3526 , A61K38/10 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了大麦虫防御素源改造抗菌肽及其应用。通过在大麦虫源昆虫防御素Z‑d14CFR第5‑11位氨基酸片段两端增加连续的2‑3对色氨酸或亮氨酸、精氨酸或赖氨酸组合的重复序列，设计得到一系列改造抗菌肽，然后通过固相合成法合成。本发明的改造抗菌肽，对多种革兰氏阴性菌及阳性菌具有良好的杀菌效果，尤其是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌具有极佳的抗菌作用，并且具有细胞毒性低、无溶血性等特点。该系列改造抗菌肽能够自组装形成纳米纤维网黏附细菌并且在短时间内通过破坏细菌膜结构的方式杀灭细菌，对临床上多种耐药菌具有极佳的杀灭能力，在临床应用方面具有极高的应用潜力。
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公开(公告)号：CN118516389A
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202410969181.2
申请日：2024-07-19
Applicant: 中国农业大学三亚研究院
Abstract: 本发明公开了一种Zophobas atratus防御素高效信号肽筛选菌株的构建方法，属于生物技术领域。本发明采用的步骤如下：（一）重组表达载体的构建；（二）构建基因工程菌；（三）诱导表达和产物鉴定。本发明通过构建Zophobas atratus防御素高效信号肽菌株，通过原核表达技术获得天然抗菌肽，克服了生产成本高，在本体动物中提取产量低的问题，并使其成为畜牧养殖中抗生素有效替代品。本发明筛选了表达宿主枯草芽孢杆菌五种信号肽，并提高其产量，同时验证了目标蛋白对多种多重耐药致病菌的抑制活性。
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公开(公告)号：CN116262781A
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202111521669.1
申请日：2021-12-13
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了抗菌肽defensin衍生物及其原核表达方法与应用。本发明通过RACE PCR的方法从大麦虫扩增出抗菌肽defensin基因编码区，通过原核表达获得了具有良好抗菌活性的重组大麦虫defensin，实现了抗菌肽defensin体外表达。然后利用生物合成技术制备了大麦虫defensin衍生物，序列如SEQ ID NO:3～8所示。试验证实重组defensin及其衍生物ZM‑d14CFR对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有良好的抗菌活性，且无细胞毒性和溶血性，是理想的抗菌物质，应用前景广阔。
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