公开(公告)号：CN105985936A

公开(公告)日：2016-10-05

申请号：CN201510053624.4

申请日：2015-02-02

Applicant: 中国人民解放军第二军医大学

Inventor： 张磊 ,  陈瑞兵 ,  黄鑫 ,  刘江华

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53

Abstract: 本发明属于生物技术和植物学技术领域，具体涉及到一种新的灯盏乙素生物合成途径代谢酶及其编码基因与应用。本发明提取成熟灯盏花的总RNA，通过cDNA末端快速克隆的技术(RACE)和逆转录PCR(RT-PCR)克隆得到基因序列，再测得其序列的碱基组成并完成必要的生物信息学分析。本发明首次克隆得到灯盏花中黄烷酮-3-羟化酶(EbF3H)，为灯盏花遗传背景和灯盏乙素生物合成途径的认识奠定了基础。

公开(公告)号：CN105255938A

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201510710821.9

申请日：2015-10-28

Applicant: 中国人民解放军第二军医大学

Inventor： 张磊 ,  黄鑫 ,  陈瑞兵 ,  刘江华

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/06

Abstract: 本发明属于植物生物技术中的植物基因工程技术领域，具体而言，涉及一种发根农杆菌介导的转基因灯盏花毛状根遗传转化的方法。本发明将预培养后的灯盏花无菌苗叶片外植体浸入携带重组质粒的C58C1发根农杆菌菌液中，经侵染、共培养及除菌处理后，将毛状根培养在含潮霉素B(Hyb)的筛选培养基上进行筛选，利用PCR扩增方法进一步鉴定携带目的基因的转基因发根后，液体培养基培养。采用本发明提供的技术方案，可将目的基因导入灯盏花，与聚乙二醇等化学方法的遗传转化相比，减少了原生质体分离和培养的环节；与基因枪等物理方法的遗传转化相比，不需要昂贵的仪器设备，且操作技术简单。

公开(公告)号：CN104541885A

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201510006715.2

申请日：2015-01-07

Applicant: 中国人民解放军第二军医大学

Inventor： 张磊 ,  陈瑞兵 ,  黄鑫 ,  刘江华

IPC: A01G1/00 ,  A01G7/06 ,  A01G7/04

CPC classification number: Y02P60/146 ,  A01G7/045 ,  A01G7/06 ,  A01G22/00

Abstract: 本发明涉及一种快速提高灯盏花中灯盏乙素含量的方法，属于生物技术和植物学技术领域。发明的主要技术方案是：将种子播种于土壤，取生长90天的灯盏花植株作为处理对象，通过茉莉酸甲酯(MeJA)进行诱导，实现快速提高灯盏乙素含量的目的。本发明克服了灯盏花中灯盏乙素含量较低，有效成分不稳定的问题。本发明经高效液相-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)实验证明，有效成分灯盏乙素含量显著提高。