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1.

发明公开
制造双链DNA片段的方法无效

公开(公告)号：CN111065737A

公开(公告)日：2020-04-24

申请号：CN201880055170.6

申请日：2018-08-28

Applicant: 丝芭博株式会社

Inventor： 伊藤雄介 , 佐藤知香子 , 谷内江望

IPC: C12N15/09

Abstract: 本发明涉及通过双重不对称PCR(DA-PCR)制造具有期望的碱基序列的双链DNA片段的方法。该方法具备：(1)准备各自相当于双链DNA片段的有义链的一部分的两种以上的寡核苷酸(有义寡核苷酸)和各自相当于双链DNA片段的反义链的一部分的两种以上的寡核苷酸(反义寡核苷酸)，将等浓度的各种寡核苷酸与DNA聚合酶和dNTP混合而制备反应混合液的步骤；(2)使用步骤(1)的反应混合液进行PCR的步骤；(3)向步骤(2)的反应混合液中添加能够扩增双链DNA片段的全长的引物对的步骤；和(4)使用步骤(3)的反应混合液进行PCR的步骤。

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