公开(公告)号：CN105368771A

公开(公告)日：2016-03-02

申请号：CN201510886141.2

申请日：2015-12-04

Applicant: 东南大学

Inventor： 李伟 ,  孙子林 ,  徐伟 ,  陈娟 ,  王晓航

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种小鼠胰岛分离纯化方法，采用自制的穿刺针由胆总管逆行穿刺并灌注胶原酶Ⅴ消化胰腺，使用一种密度梯度介质离心结合手工挑选的方法分离纯化胰岛。双硫腙染色鉴定胰岛纯度，AO/PI染色鉴定胰岛活力。葡萄糖刺激的胰岛素释放实验检测胰岛功能。采用此法在大规模的提取胰岛时可以很大程度的节省时间，提高穿刺成功率，减少Ficoll400配制的时间及价格。同时，纯化所得胰岛产量、纯度、活力及胰岛功能都相对良好，是一种简单快捷，廉价高效的小鼠胰岛分离方法。

公开(公告)号：CN105368771B

公开(公告)日：2019-03-05

申请号：CN201510886141.2

申请日：2015-12-04

Applicant: 东南大学

Inventor： 李伟 ,  孙子林 ,  徐伟 ,  陈娟 ,  王晓航

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种小鼠胰岛分离纯化方法，采用自制的穿刺针由胆总管逆行穿刺并灌注胶原酶Ⅴ消化胰腺，使用一种密度梯度介质离心结合手工挑选的方法分离纯化胰岛。双硫腙染色鉴定胰岛纯度，AO/PI染色鉴定胰岛活力。葡萄糖刺激的胰岛素释放实验检测胰岛功能。采用此法在大规模的提取胰岛时可以很大程度的节省时间，提高穿刺成功率，减少Ficoll400配制的时间及价格。同时，纯化所得胰岛产量、纯度、活力及胰岛功能都相对良好，是一种简单快捷，廉价高效的小鼠胰岛分离方法。