公开(公告)号：CN119120372A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411439467.6

申请日：2024-10-15

Applicant: 东南大学 ,  东南大学深圳研究院

Inventor： 张莎莎 ,  柴人杰 ,  江佩

IPC: C12N5/079

Abstract: 本发明公开了一种耳蜗组织小细胞外囊泡的富集方法，属于生物学领域。该方法包括以下步骤：将所述耳蜗组织的基底膜、螺旋韧带与蜗轴放入培养皿中培养，并切块；加入酶进行消化处理；消化后的耳蜗通过超速离心法、蔗糖密度梯度法或者尺寸排阻法处理，分离获得耳蜗组织小细胞外囊泡。本发明的目的是为了解决在内耳组织提取富集sEV的技术问题，本发明提出一种提取富集内耳组织sEV的方法，为深入研究sEV在听觉系统中作用提供sEV的分离纯化方法。本发明通过对文献中其他组织sEVs提取富集方式的改变获得了最优适用于内耳组织sEVs的提取方式。本发明将在一定程度上促进听觉领域中sEVs的研究。

公开(公告)号：CN115885929A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211428434.2

申请日：2022-11-15

Applicant: 东南大学

Inventor： 柴人杰 ,  江佩 ,  张莎莎

IPC: A01K67/027 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明公开过表达Rassf2基因调控内耳毛细胞增殖的应用，属于生物技术领域，包括一种Rassf2基因小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：步骤一：构建Rassf2loxp/loxp过表达小鼠和Lgr5Cre/ER小鼠；步骤二：再将Rassf2loxp/loxp与Lgr5Cre/ER小鼠交配；步骤三：获得新生的Rassf2loxp/loxpLgr5Cre/ER小鼠，并在出生后的第一天激活Cre酶表达，出生后第七天收取小鼠基底膜；步骤四：在将基底膜三个部分，分别进行免疫荧光染色，标记毛细胞，染色后进行拍摄，最后对增多毛细胞进行统计。本发明的发明目的是通过在小鼠内耳支持细胞中特异性的过表达Rassf2基因来促进内耳干细胞增殖，从而为临床中改善听力损失提供理论基础。

公开(公告)号：CN112941013A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202110193781.0

申请日：2021-02-20

Applicant: 东南大学

Inventor： 柴人杰 ,  江佩 ,  张莎莎 ,  程诚 ,  高下

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明公开了一种Net1基因细胞模型的构建方法与应用，属于生物技术领域。一种Net1基因细胞模型的构建方法，包括以下步骤：步骤1：培养OC‑1细胞，用siRNA敲减所述OC‑1细胞中的Net1基因，检测敲减效率；步骤2：Lgr5‑EGFP小鼠耳蜗，消化成单细胞后，分选出表达Lgr5细胞，在细胞培养皿中培养；通过siRNA敲除所述表达Lgr5细胞中的Net1基因；步骤3：进行细胞成球试验，观察并量化球形的数量和直径来评估所述表达Lgr5细胞的增殖、分化能力。