公开(公告)号：CN108486222A

公开(公告)日：2018-09-04

申请号：CN201810227750.0

申请日：2018-03-20

Applicant: 东南大学

Inventor： 卫伟 ,  杨海堂 ,  刘松琴

IPC: C12Q1/682

Abstract: 本发明公开一种基于核酸染料TOTO-1对单链G序列荧光增强的检测端粒酶活性的方法。本方法步骤如下：1）细胞的培养以及端粒酶的提取得到裂解后的细胞溶液；2）将裂解后的细胞溶液加入端粒酶扩增缓冲溶液，对端粒酶引物进行扩增，得到重复的富G序列的产物溶液；3）加入TS primer的互补序列，杂交后，再加ExoⅢ酶切除双链，最后加TOTO-1，孵育，检测荧光光谱。本发明利用了TOTO对含G碱基DNA链的识别作用来检测端粒酶，简化了检测方法，避免了标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐，重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高的优点。

公开(公告)号：CN108486222B

公开(公告)日：2021-08-10

申请号：CN201810227750.0

申请日：2018-03-20

Applicant: 东南大学

Inventor： 卫伟 ,  杨海堂 ,  刘松琴

IPC: C12Q1/682

Abstract: 本发明公开一种基于核酸染料TOTO‑1对单链G序列荧光增强的检测端粒酶活性的方法。本方法步骤如下：1）细胞的培养以及端粒酶的提取得到裂解后的细胞溶液；2）将裂解后的细胞溶液加入端粒酶扩增缓冲溶液，对端粒酶引物进行扩增，得到重复的富G序列的产物溶液；3）加入TS primer的互补序列，杂交后，再加ExoⅢ酶切除双链，最后加TOTO‑1，孵育，检测荧光光谱。本发明利用了TOTO对含G碱基DNA链的识别作用来检测端粒酶，简化了检测方法，避免了标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐，重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高的优点。