公开(公告)号：CN102321623B

公开(公告)日：2013-04-17

申请号：CN201110246952.8

申请日：2011-08-25

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 陈雅君 ,  张璐 ,  刘威 ,  王艳彬 ,  陈阳

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/29 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种克隆草地早熟禾水通道蛋白内参基因的方法，所述方法包括：(1)以草地早熟禾总RNA为模板反转录获得cDNA第一链；(2)以cDNA为模板，以引物：EF1αF1进行PCR扩增；(3)扩增产物回收目的基因条带；(4)将获得的目的基因连接到pMD18-T载体中，转化至感受态细胞中，对培养菌液进行DNA测序，得到176bp早熟禾水通道蛋白内参基因序列。本发明方法获得的草地早熟禾EF-1α内参基因不受细胞生长状态影响，能经受住外界非生物因素影响，在组织中表达非常稳定，优于传统内参基因。

公开(公告)号：CN102321623A

公开(公告)日：2012-01-18

申请号：CN201110246952.8

申请日：2011-08-25

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 陈雅君 ,  张璐 ,  刘威 ,  王艳彬 ,  陈阳

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/29 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种克隆草地早熟禾水通道蛋白内参基因的方法，所述方法包括：(1)以草地早熟禾总RNA为模板反转录获得cDNA第一链，(2)以cDNA为模板，以引物：EF1αF1进行PCR扩增，(3)扩增产物回收目的基因条带，(4)将获得的目的基因连接到pMD18-T载体中，转化至感受态细胞中，对培养菌液进行DNA测序，得到174bp早熟禾水通道蛋白内参基因序列。本发明方法获得的草地早熟禾EF-1α内参基因不受细胞生长状态影响，能经受住外界非生物因素影响，在组织中表达非常稳定，优于传统内参基因。