公开(公告)号：CN117925804A

公开(公告)日：2024-04-26

申请号：CN202410048332.0

申请日：2024-01-12

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 尹智 ,  翁晓刚 ,  芦春雪 ,  王璐瑶 ,  张宇霆 ,  刘忠华

IPC: C12Q1/6879 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/6848 ,  C12N15/11

Abstract: 一种基于两步巢式PCR技术鉴定猪胚胎单细胞性别的方法，属于生物工程技术领域。本发明为解决现有技术中的胚胎细胞性别鉴定技术存在操作繁琐、操作时间长、技术要求较高，准确性、稳定性和灵敏性较低的技术问题，提供了一种基于两步巢式PCR技术鉴定猪胚胎单细胞性别的方法，通过对巢式PCR鉴定体系进行优化，将常规PCR酶替换为KOD酶，发现其扩增效果较好；提供的鉴定方法可以实现10个以上细胞样本的性别鉴定，确定AMEL引物对扩增效率较高，灵敏度更强；本发明提供的巢式PCR技术极大地提高了PCR的灵敏性，获得的电泳条带清晰无非特异性扩增，具有操作简单、鉴定周期短的优点，适合产业应用。