公开(公告)号：CN109251966A

公开(公告)日：2019-01-22

申请号：CN201811178175.6

申请日：2018-10-10

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 霍俊伟 ,  张妍 ,  刘化禹 ,  孙丰 ,  秦栋

IPC: C12Q1/6858 ,  C12Q1/6895

Abstract: 蓝果忍冬SRAP反应体系的建立属于分子生物学领域，SRAP作为一种新型的分子标记，具有操作简单、稳定和高效等特点，广泛应用于不同作物的图谱构建、基因定位和遗传多样性分析各种研究，与其他PCR技术类似，其扩增结果易受到Tag DNA聚合酶、模板DNA、dNTPs、Mg2+、引物等反应因素的影响，因此，进行SRAP体系的优化是获得较好研究结果的先决条件。建立蓝果忍冬SRAP反应体系，能够简单、稳定、高效的获得丰富的多态性DNA，以应用于蓝果忍冬的图谱构建、基因定位和遗传多样性分析等。

公开(公告)号：CN109182333A

公开(公告)日：2019-01-11

申请号：CN201811178205.3

申请日：2018-10-10

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 霍俊伟 ,  张妍 ,  刘化禹 ,  孙丰 ,  秦栋

IPC: C12N15/10

Abstract: 一种蓝果忍冬基因组DNA提取方法属于分子生物学，该方法主要包括以下步骤：首先破碎细胞壁和细胞膜，使DNA充分释放到缓冲液中；其次消除蛋白质、多糖、色素等杂质的干扰；最后防止DNA的降解。用SET核分离缓冲液对样品进行处理，可以很好的将细胞核与上清液中的多糖和多酚等次生物质分开，在研磨过程中加入的PVP以及在后续过程中加入的β-巯基乙醇，可以有效的防止多酚物质的氧化，氯仿/异戊醇抽提时，中间加入稀释的CTAB以除去多糖。忍冬科植物叶片中含有丰富的糖类和多酚类物质，这些物质会影响DNA的提取效果，而且对PCR时的Tag酶的活性产生影响，通过这种基因组DNA提取方法，获得了产量高、质量好的DNA，DNA电泳条带清晰明亮，无拖尾现象，能够满足进一步的分子水平的研究。